Desarrollo de un método para la determinación simultánea de andrógenos en suero de peces.

BLASCO, MARTÍN; CARRIQUIRIBORDE, PEDRO; MARINO, DAMIÁN; RONCO, ALICIA; SOMOZA, GUSTAVO M.

Buenos Aires

Congreso; X Jornadas Anuales de la Sociedad Argentina de Biología; 2008

Sociedad Argentina de Biología

Los andrógenos 11 oxigenados son los andrógenos bioactivos en peces. Las técnicas utilizadas para su cuantificación (RIA o ELISA) requieren no sólo de anticuerpos y hormonas marcadas no siempre disponibles sino también de volúmenes de suero relativamente grandes. En este contexto, el objetivo de este trabajo fue desarrollar un método de cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas (LC-MS) para determinar andrógenos en suero de goldfish (Carassius auratus) como primer aproximación experimental. Se utilizó un sistema Agilent 1100 LC system con una columna C-18. La fase móvil fue acetonitrilo (55%) y ácido fórmico 0.1 % en agua en forma isocrática por 12 minutos. Los esteroides: T, 11-KT y 11βOHA4 se extrajeron en forma convencional, fueron evaporados y luego re-suspendidos en fase móvil. En estas condiciones los tres esteroides pudieron resolverse claramente. El método presentó un límite de detección < 0,25 ng/mL y de cuantificación < 0,5 ng/mL para los esteroides estudiados, utilizando solamente 20 µL de suero. La determinación de estos tres andrógenos en suero de goldfish, un modelo experimental muy utilizado, arrojó valores comparables a los informados para esta especie medidos por RIA o ELISA, Esto demuestra la utilidad del método para el estudio del rol fisiológico de estos andrógenos en peces.