CARACTERIZACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE LOS FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN INDUCIBLES POR HIPOXIA (HIFs) EN CÉLULAS DE SERTOLI (CS).

MERLO JOAQUÍN; REGUEIRA MARIANA; RIERA M FERNANDA; PELLIZZARI ELIANA H; CIGORRAGA SELVA B; MERONI SILVINA B; GALARDO MARÍA N

Congreso; LIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2014

SAIC

Los HIFs son factores de transcripción (FT) que regulan el metabolismo glucolítico y crecimiento celular. Están formados por la subunidad alfa (HIFa), cuya estabilidad depende de los niveles de O2, y la beta de expresión constitutiva. Existen 3 isoformas alfa, que se asocian con HIF B y constituyen los FT activos HIF1, 2 y 3. Previamente demostramos que la estabilización de HIF aumenta la producción de lactato y que FSH aumenta la expresión de HIF1a en CS de rata de 20 días de edad (CS20). El objetivo de este trabajo fue analizar la expresión de las isoformas α en CS a través de la maduración y la posible participación de los HIFs en la regulación de la producción de lactato por FSH en CS20. En cultivos de CS de ratas de 8 (CS8), 20 y 31 (CS31) días de edad se determinaron los niveles de ARNm de HIF1a, 2a y 3a. Se observó mayor expresión de HIF1a (CS8:1.89±0.54a,CS20:0.73±0.19b,CS31:0.76±0.1b) y de HIF3a (CS8:4.16±0.14a,CS20:1.07±0.30b,CS31:0.28±0.05c) en CS8. La expresión de HIF2a fue mayor en CS20 (CS8:0.34±0.4a,CS20:1.08±0.13b,CS31:0.29±0.11a). Resultados expresados como relación de la cantidad de ARNm HIFa/HPRT (X±DS; n=3), distintas letras indican diferencias significativas. Por otro lado, utilizando en CS20 un agente que promueve la degradación de HIFa (LW6, 10µM), se demostró la participación de HIF en la regulación por FSH de diversos mecanismos involucrados en la producción de lactato. En particular se observó que LW6 inhibe el estímulo de FSH (100ng/ml) sobre: la producción de lactato (B:9.98±1.13a,FSH:15.15±0.31b,FSH+LW6:9.94±1.06aµg/µgADN), la entrada de glucosa a la célula (B:267±12a,FSH:352±7b,FSH+LW6:226±35adpm/µgADN) y la expresión de Piruvato Kinasa M2 (FSH:1.5±0.2a,FSH+LW6:1.0±0.1bveces con respecto a B). Los resultados demuestran una expresión variable de las isoformas HIFa con la maduración. Adicionalmente sugieren que dicho FT participa en la regulación por FSH de la producción de lactato, nutriente esencial para las células germinales. PICT2012-0666