Influencia de la composición del medio de cultivo sobre la actividad esterasa en microorganismos del género Bacillus

LOTO FLAVIA; BAIGORI, MARIO; PERA, LICIA

Tafí del Valle, Tucumán

Congreso; XXII Jornadas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2005

Asociación de Biología de Tucumán

Las carboxilesterasas (E.C.3.1.1.1) son enzimas que poseen la habilidad de catalizar biotransformaciones como la esterificación y la transesterificación. Las aplicaciones potenciales incluyen la modificación de azúcares, la síntesis de ésteres saborizantes para la industria alimentaria y la resolución de mezclas racémicas, entre otras. En dichas aplicaciones, un alto rendimiento a bajo costo es un requisito fundamental, como en cualquier proceso biotecnológico, lo cual es factible de obtener mediante la modificación genética del microorganismo y/o la manipulación, hasta una optimización del medio de cultivo. El objetivo de este ensayo es evaluar la variación de la actividad esterasa en diferentes medios de cultivos. Se utilizaron las cepas, Bacillus subtilis 168(actividad en célula) y Bacillus sp. A60(actividad en sobrenadante), las cuales se cultivaron a 37°C en baño con agitación durante 8h y 24 h respectivamente. Se utilizó el medio Luria-Bertani (LB) como control y modificaciones del mismo,.variando la concentración de sus componentes: tripteína, NaCl y extracto de levadura. Se evaluó en cada caso, crecimiento (D:O610 nm) y actividad esterasa . La cepa A60 presentó la mayor actividad específica en el medio con mayor concentración de extracto de levadura. Las menores actividades correspondieron a las concentraciones nulas de tripteína y de extracto de levadura. En general, no hubo un pico máximo significativo en los medios ensayados. La cepa 168 presentó las mayores actividades específicas cuando los medios carecían totalmente de alguno de los componentes, mostrando una tendencia a la disminución de dicha actividad, a medida que aumentaba la concentración de los mismos. El crecimiento fue menor en los medios que no contenían tripteína o extracto de levadura, por lo que la mayor actividad no se deberia a un aumento en la biomasa, sino que podría corresponder a una activación catabólica en respuesta a la falta de dichas sustancias. De acuerdo a estos resultados, la actividad esterasa de B. subtilis 168, es factible de ser modificada positivamente mediante cambios en el medio de cultivo.