Modelo de ensayo aplicable a la evaluación de difusión in vitro de fármacos en mucina

CALDAROLA MP; GÓMEZ MA; BUCALÁ V; RAMIREZ RIGO MV

Guatemala

Simposio; Simposio Iberoamericano en línea - COIFFA - 2022- Salud Global y Sostenibilidad; 2022

COIFFA

INTRODUCCIÓN: Las característicasfisiopatológicas de la mucosa del tracto respiratorio pueden alterar ladifusión de los fármacos administrados por vía pulmonar e impedir que elprincipio activo alcance el blanco terapéutico. Esto pone demanifiesto la importancia de analizar la difusión de los fármacos en mucina(MUC) desde las primeras etapas del desarrollo de un medicamento inhalable (Falavignaet al., 2020). OBJETIVO: Diseñar un ensayoque permita evaluar, in vitro, ladifusión de fármacos en MUC, y sea factible de realizar con instrumentaciónestándar disponible en laboratorios de investigación farmacéutica. METODOLOGÍA: Empleandosoluciones acuosas de colorantes rojo de metilo y azul de metileno, se evaluaroncualitativamente diferentes formatos de ensayos de difusión en MUC de estómagoporcino 3% m/v: (a) vertical, utilizando una cubeta (di Cagno et al.,2018; Falavigna et al., 2020), (b) radial (Iasella et al., 2019) y (c)horizontal; estableciendo sus ventajas y desventajas. En base a su comparación,el modelo horizontal en canal de vidrio fue seleccionado para realizar ensayoscuantitativos. Para ello, se diseñó un dispositivo de vidrio semi cilíndrico de0.5 cm de ancho y 7.1 cm de largo, cuyo volumen se completó con MUC. Seañadieron 60 μL de la solución de cada colorante en el extremo lateral delcanal, y se tomaron fotografías cada 120 segundos durante un total de 30minutos, registrando en cada medición la difusión máxima observable alcanzada (encm). Se comparó gráficamente la difusión de cada colorante en diferentesconcentraciones de MUC (1,3 y 5% m/v). RESULTADOS: Enlos ensayos cualitativos, el formatovertical presentó una elevada perturbación del sistema al añadir agua destilada,sumada a la dificultad para colocar el colorante en forma homogénea. El modeloradial, por su parte, requirió emplear una elevada cantidad de MUC y trabajar enmesada/ superficie nivelada. En el ensayo cuantitativo,las curvas de difusión en función del tiempo indican que ambos colorantespresentan, entre los 5 y 30 minutos, una mayor difusión lineal a menoresconcentraciones de MUC. CONCLUSIONES. En la evaluacióncualitativa, la utilización de soluciones de colorantes permitió identificar elmodelo experimental más adecuado por inspección visual. Por otro lado, en elensayo cuantitativo, la relación de proporcionalidad inversa entre la difusióny la concentración de MUC para ambos colorantes, permite trasladar el análisisa situaciones fisiopatológicas del paciente, donde el moco presenta mayorviscosidad. De este modo, se obtuvo un modelo de ensayo de difusión linealfácil de implementar con materiales disponibles en laboratorios de tecnologíafarmacéutica, aplicable a la evaluación de fármacos inhalables.