Aceite esencial de Thymus vulgaris incorporado en nanovesículas lipídicas

PEREZ AP; PEREZ N; ROMERO EL

La Plata

Workshop; Workshop Iberoamericano sobre Biomateriales para Aplicaciones Médicas; 2017

Los aceites esenciales son líquidos obtenidos de plantas aromáticas, formados por una mezcla de compuestos orgánicos de bajo peso molecular (1). El aceite esencial (AE) de Thymus vulgaris (AETv), compuesto principalmente por Timol, posee una potente actividad antibacteriana. Sin embargo, su uso está limitado por su baja solubilidad en agua, su volatilidad y su rápida descomposición por exposición a calor y oxígeno. La incorporación del AETv en nanovesículas lipídicas podría favorecer la obtención de una suspensión acuosa estable y protegerlo de la descomposición (1). Además, en el contexto del tratamiento de infecciones bacterianas en biofilm (comunidades de bacterias que crecen adheridas a la superficie de un tejido vivo), nanovesículas lipídicas podrían penetrar la matriz del biofilm y mantenerse allí liberando el AE en altas dosis en la proximidad de las bacterias, prolongando el tiempo de contacto. Esto se ha demostrado con antibióticos incorporados en liposomas (2). Por ello, el objetivo de este trabajo es obtener una formulación estable de AETv incorporado en nanovesículas lipídicas, para potenciar su actividad antibiofilm.La obtención de una suspensión de nanovesículas estable y homogénea fue dependiente de la combinación de distintas cantidades de: a) fosfolípidos (fosfatidilcolina de soja (SPC) y/o arqueolípidos polares extraídos de la arquebacteria hiperhalófila Halorubrum tebenquichense (APT)), b) surfactantes (Tween 80 (T80) o Colato de Sodio (ColNa)), c) AETv, y d) buffer Tris-HCl. Las formulaciones, obtenidas mediante el método de hidratación de la película lipídica, se caracterizaron por su aspecto macroscópico, cuantificación de fosfolípidos, tamaño, polidispersidad y potencial Zeta. La cuantificación de AETv se determinó por espectrofotometría UV a 275 nm.Al combinar SPC o APT en distintas relaciones con AETv no se logró obtener una suspensión de nanovesículas. El AETv impidió la interacción entre los fosfolípidos lo que produjo la formación de agregados. La incorporación de T80 o ColNa favoreció la obtención de nanovesículas lipídicas, aunque varias formulaciones fueron suspensiones heterogéneas. Sin embargo, entre las formulaciones en las que se obtuvo suspensión homogénea, al utilizar T80, en relaciones 20:15:27 g:g:μg de SPC:T80:AET, se cuantificó mayor concentración de AETv (19,9 ± 7,2 μg/ml) que al utilizar ColNa (16,1 ± 1,4 μg/ml de AETv). Asimismo, la suspensión homogénea con mayor concentración de AETv se obtuvo al combinar 20:20:60:55 g:g:g:μg de SPC:APT:T80:AETv con una concentración final de 44,4 ± 1,9 μg/ml de AETv. Esta formulación fue reproducible y de tamaño hidrodinámico 430,9 nm, índice de polidispersidad 0,45 y potencial Z de -5,5 mV.En conclusión, la incorporación de surfactantes en la mezcla de fosfolípidos y AETv fue necesaria para la formación de una suspensión de nanovesículas. El uso de T80 aumentó la concentración de AETv en la membrana de nanovesículas en comparación con ColNa. Además, la incorporación de APT (sn 1,2 glicerol éter lípidos que poseen cadenas poliisoprenoides saturadas) permitió obtener la mayor concentración de AETv en una suspensión de nanovesículas lipídicas homogénea. Se realizarán nuevos estudios para determinar la naturaleza de las interacciones entre los componentes de las formulaciones. Esto permitirá optimizar la obtención de una suspensión de nanovesículas lipídicas estable con una concentración de AETv que permita maximizar su actividad antibiofilm bacteriano.Referencias1. El Asbahani A, Miladi K, Badri W, Sala M, Aït Addi EH, Casabianca H, El Mousadik A, Hartmann D, Jilale A, Renaud FN, Elaissari A. Essential oils: from extraction to encapsulation. Int J Pharm. 2015;483(1-2):220-243.2. Alhajlan M, Alhariri M, Omri A. Efficacy and safety of liposomal clarithromycin and its effect on Pseudomonas aeruginosa virulence factors. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2013;57:2694-2704.Agradecimientos: Este trabajo fue financiado por la Secr. de Inv. de UNQ. Las Dras. Pérez y Romero son investigadoras de CONICET. La est. Noelia Pérez posee una beca del CIN-UNQ.