Desarrollo de un modelo murino para estudiar el mecanismo de la fiebre hemorrágica del dengue en niños lactantes

MAURI A; BATALLE, JP; DIAZ, LM; ACOSTA PL; POLACK FP; TALARICO, LB

Buenos Aires

Congreso; X Congreso Argentino de Virología; 2011

Sociedad Argentina de Virología

Los cuatro serotipos del virus dengue (DENV) producen la enfermedad transmitida por artrópodos con mayor prevalencia en humanos. Las epidemias por fiebre hemorrágica del dengue (FHD) afectan principalmente a los niños y están asociadas con altas tasas de mortalidad. A pesar de esta grave situación, actualmente no se dispone de una terapia antiviral específica ni vacunas para el tratamiento y la prevención de la infección por DENV. La FHD puede ser severa y/o fatal y se caracteriza principalmente por permeabilidad vascular incrementada, trombocitopenia, transaminitis y hemorragias. El 90% de los casos de FHD sucede en infecciones secundarias heterólogas por DENV, mientras que el 10% afecta a niños menores de un año durante infecciones primarias.Se han propuesto varias hipótesis para explicar el mecanismo de la enfermedad de la FHD durante la infección heteróloga. La más aceptada hasta el momento, conocida como respuesta aumentada mediada por anticuerpos (ADE) propone que en presencia de concentraciones sub-neutralizantes de anticuerpos anti-DENV se forman complejos virus-anticuerpo que pueden internalizarse a células que expresan receptores Fc-gama, principalmente células mononucleares fagocíticas, facilitando la entrada viral. La mayoría de los casos de FHD en niños lactantes está asociada con infección primaria por DENV, en la cual los anticuerpos maternos han sido implicados en la severidad de la enfermedad. La FHD afecta a los niños lactantes cuando los anticuerpos maternos transplacentarios se reducen a concentraciones sub-neutralizantes y se cree que aumentarían la replicación viral. Aparte de la hipótesis ADE, no se han explorado otros mecanismos que involucren anticuerpos mediante los cuales el DENV podría causar enfermedad severa en lactantes. Existen varias enfermedades virales cuya severidad está mediada porcomplejos inmunes, activación de complemento y activación de receptores Fc-gama. El objetivo de este trabajo fue establecer un modelo de FHD en ratones lactantes con el fin de estudiar estos mecanismos y comparar sus contribuciones individuales a la patogénesis de la enfermedadpor DENV. La estrategia utilizada constó de una transferencia pasiva de sueros inmunes anti-DENV-1, anti-DENV-2 o suero normal a ratones C57BL/6 de 10-14 días de vida por vía intraperitoneal (IP). A las 8hs post-inoculación se realizó la infección con DENV-2con 104 UFP por vía IP. A los 0, 3 y 7 días post-infección se extrajo sangre y se determinó la cantidad de virus por ensayo de placas y RT-PCR en tiempo real. Asimismo, se determinó la cantidad de anticuerpo en suero por ensayo de ELISA. Se analizaron daños histológicos en bazo, hígado y riñón, parámetros bioquímicos y permeabilidad vascular en los grupos de ratones infectados. El modelo murino de FHD en lactantes que hemos desarrollado manifiesta síntomas de la enfermedad presentes en humanos: trombocitopenia, transaminitis y hemorragias internas.La puesta a punto de un modelo murino de FHD permitirá estudiar los posibles mecanismos responsables de la patogénesis de la enfermedad severa por DENVen niños lactantes y contribuirá al desarrollo de vacunas efectivas y tratamientos contra la enfermedad.