Caracterización de la infección con virus dengue en ausencia y en presencia de anticuerpos en un modelo de ratón lactante

GARCIA A; BRAHAMIAN JM; MAURI A; ACOSTA PL; POLACK FP; TALARICO, LB

Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología; 2013

Asociación Argentina de Microbiología

Los cuatro serotipos del virus dengue (DENV) producen la enfermedad viral transmitida por artrópodos con mayor prevalencia en humanos. Aproximadamente, 5% de los casos de dengue grave se observa en niños lactantes, quienes se piensa experimentan aumento de la infección dependiente de anticuerpo como consecuencia de la presencia de anticuerpos maternos transplacentarios en niveles sub-neutralizantes. El objetivo de este trabajo fue caracterizar la infección por DENV en ausencia y en presencia de anticuerpos en un modelo de ratón lactante con el fin de estudiar mecanismos responsables de la enfermedad grave por DENV. La infección en ausencia de anticuerpos se realizó con DENV-2 por vía intraperitoneal (i.p.) en ratones BALB/c y C57BL/6 lactantes (3 días) y en ratones adultos (60 días), con fines comparativos. Para la infección en presencia de anticuerpos, se transfirieron sueros inmunes de ratón anti-DENV-1, anti-DENV-2 o suero normal a ratones lactantes y adultos por vía i.p. y luego se realizó una inoculación con DENV-2 i.p. En los ratones lactantes infectados con DENV-2 no se observó retraso en el crecimiento, sin embargo a los 8 días post-infección (p.i.) se detectó una 80% de sobrevida en comparación con un 100% en los ratones adultos infectados. Los parámetros bioquímicos en plasma a los 8 días p.i. reflejaron lesiones tisulares en los ratones lactantes. Se detectó ARN viral por RT-PCR en tiempo real en intestino, hígado y riñón en ratones lactantes infectados y viremia hasta las 24 horas p.i. En los cortes histológicos de intestino se observó enteritis viral, en hígado hepatosis difusa, en riñón signos de nefrosis tubular y en bazo folículos moderadamente reactivos. No se observaron alteraciones en los cortes histológicos de los ratones adultos infectados. Se comenzó a analizar el perfil inflamatorio luego de la infección con DENV-2, estudiando las cantidades relativas de ARNm de los factores de transcripción correspondientes a los linfocitos T helper (Th) 1 (T-bet), Th2 (GATA-3) y Th17 (ROR-gT) a partir de células mononucleares de sangre periférica. Se encontró un perfil inflamatorio distinto en ratones BALB/c y C57BL/6 lactantes y adultos luego de la infección por DENV. Con respecto a la infección en presencia de anticuerpos, los cortes de bazo a los 8 días p.i. de los ratones lactantes y adultos que recibieron suero anti-DENV-1 y luego infección con DENV-2 (α-DENV-1/DENV-2) presentaron mayor número de megacariocitos que los otros dos grupos (placebo/DENV-2 y α-DENV-2/DENV-2) y los cortes de hígado de los ratones adultos del grupo α-DENV-1/DENV-2 mostraron focos de infiltración celular. Estos resultados indicarían una mayor susceptibilidad a la infección primaria por DENV en ratones lactantes en comparación con adultos, sugiriendo una inmadurez inmunológica a este tiempo de vida. Se comenzó a establecer un modelo de ratón lactante de la enfermedad por DENV donde sería posible estudiar los mecanismos de la patogénesis de la enfermedad.