INVESTIGADORES
VIZIOLI nora Matilde
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto de la disposición espacial de las porfirinas unidas a la pared de columnas capilares sobre la interacción péptido ligando
Autor/es:
YONE A; GRELA D; CARBALLO R; VIZIOLI NM
Lugar:
Santa Fe
Reunión:
Congreso; 6to Congreso Argentino de Química Analítica; 2011
Resumen:
Durante la última década ha crecido el interés en el uso de la electrocromatografía capilar para la caracterización de péptidos y proteínas en proteómica así como también en el control de producción de proteínas recombinantes. En consecuencia, la separación, el análisis y la caracterización de este tipo de moléculas por los métodos de electromigración capilar reciben gran atención en la actualidad [1]. En el presente trabajo se modificó covalentemente la pared interna de columnas de sílica fundida con Cu(II) deuteroporfirina (Cu(II)-dP) y con Cu(II)mesotetra (carboxifenil) porfirina (Cu(II)-TCPP) [2]. Se analizaron soluciones de los péptidos sintéticos angiotensina I, bradikinina, hormona liberadora de la hormona luteinizante (LHRH), oxitocina y metionin-encefalina. La solución de corrida consistió en fosfato de potasio 25 mM, pH 4,0, conteniendo acetonitrilo 5%, v/v, e hidroquinona 10 mM. La columna capilar fue de 35 cm de largo x 50 m de diámetro interno. Las separaciones se llevaron a cabo a 12 kV, 25°C, con detección UV a 214 nm. Se analizaron estadísticamente los valores calculados de las movilidades electroforéticas efectivas de cada péptido en las diferentes columnas y se compararon entre sí. En las columnas Cu(II)-TCPP, en las que la porfirina estaba unida a la pared por tres de sus cuatro grupos carboxilos, los péptidos bradikinina y angiotensina I mostraron una mayor interacción con la fase estacionaria que en las columnas Cu(II) dP (disposición perpendicular a la pared o de stacking). Este comportamiento se explicaría por la presencia de un aminoácido triptofano cercano a residuos de histidina y el marcado carácter aromático del anillo porfirínico, más expuesto en las columnas Cu(II) TCPP. Si bien la LHRH presenta en su estructura aminoácidos aromáticos, no cuenta con el aminoácido triptofano y posee una conformación espacial de tipo extendida, razón por la cual su interacción con el anillo porfirínico estaría más favorecida en la columna Cu(II) dP. De esta manera, la conformación espacial resultante de las condiciones de unión de los grupos activos a la pared de la columna sería un factor importante que afecta la interacción péptido ligando.