LA HISTAMINA ESTIMULA LA PROLIFERACIÓN DE LAS CÉLULAS DE LEYDIG MA-10 A TRAVÉS DE LA UNIÓN A SU RECEPTOR H2 Y EL AUMENTO TRANSITORIO EN LA PRODUCCIÓN DE AMPC

MONDILLO, C; PAGOTTO, R; MONZÓN, C; ROGIC, G; BESIO MORENO, M; PIGNATARO, OP

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

SAIC

La histamina (HA) modula la proliferación celular en varios modelos experimentales, incluyendo células normales y tumorales. En nuestro laboratorio demostramos que tanto células de Leydig (CL) normales de rata como la línea de CL de ratón MA-10 expresan los receptores histaminérgicos H1 y H2, y que la HA regula la esteroidogénesis en dichas células. En el presente trabajo evaluamos el posible papel de HA como modulador de la proliferación de las CL y su mecanismo de acción, utilizando la línea MA-10 como modelo experimental. Observamos un incremento significativo de la proliferación celular luego de 24 horas de tratamiento con HA en todas las concentraciones estudiadas (0,1 nM a 10 uM), tanto al emplear la técnica de incorporación de timidina tritiada como un método colorimétrico (MTS). Los resultados fueron similares ante el tratamiento con amthamina (A, agonista específico H2). Dado que en CL H2 está acoplado a la vía adenil ciclasa (AC)/ AMPc/PKA, estudiamos el efecto de 24 horas de tratamiento con forskolina (FSK, estimulador directo de AC) o db-AMPc (análogo permeable del AMPc). Ambos compuestos inhibieron la proliferación de manera concentración-dependiente. Medimos luego los niveles de AMPc intracelular por RIA a distintos tiempos de incubación con FSK, HA o A. FSK indujo un aumento sostenido en los niveles de AMPc, mientras que para HA y A el aumento fue transitorio. Evaluamos entonces el efecto de un tratamiento de sólo 15 minutos con db-AMPc sobre la proliferación celular, y observamos inducción de la misma. Repetimos el tratamiento de 24 horas con HA o A agregando isobutil metil xantina (inhibidor de la enzima fosfodiesterasa) 15 minutos después de iniciado el mismo, y observamos inhibición de la proliferación. En conjunto, estos resultados sugieren que la HA estimula la proliferación de las CL MA-10 involucrando al menos la activación de H2 y un aumento transitorio en los niveles de AMPc. Subsidios: CONICET, UBA, ANPCYT, F Roemmers.