IBYME   02675
INSTITUTO DE BIOLOGIA Y MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Regulación de los niveles de AMPc en celulas tumorales pancreaticas AR42J. Rol de las proteinas asociadas a resistencia a multidrogras (MRPs).
Autor/es:
DIEZ F; RODRIGUEZ M; GOMEZ N; GARCIA C; COPSEL S; SHAYO C; BIANCIOTTI L; DAVIO C
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología y XLII Reunión de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; 2010
Institución organizadora:
SAIC
Resumen:
La
señalización vía AMPc controla procesos celulares tales como proliferación,
diferenciación y apoptosis, tanto en células normales como tumorales. La
regulación de los niveles intracelulares de AMPc (AMPci) esta mediada por su
degradación a través de fosfodiesterasas, desensibilización de GPCRs y
recientemente se asoció también a su
exclusión por medio de MRPs. En este trabajo estudiamos dicha regulación en
células AR42J frente a agentes capaces de modular el AMPc. Sus niveles se
evaluaron a través de un ensayo de competición de [3H]AMPc por PKA. Sorprendentemente,
Amtamina (agonista H2) y prostglandina E2de manera tiempo y concentración
dependiente, disminuyen el AMPci (65% vs basal en ambos casos), mientras que en
acinos pancreáticos normales inducen un incremento del mismo. Por otra parte,
Forskolina y Secretina producen un incremento del AMPci alcanzando un máximo a
los 5 minutos y permaneciendo elevado por encima del nivel basal por el resto
del ensayo (1h). La acumulación de AMPc extracelular (AMPce) aumenta alcanzando
su máximo nivel a la hora de estimulo. El tratamiento con Probenecid (inhibidor
de MRPs) inhibió dicha exclusión (35 y 85% respectivamente) y al mismo tiempo
causó un mayor incremento del AMPci (20 y 59% respectivamente). El patrón
cinético no se modificó en presencia de MIX (inhibidor de fosfodiesterasas).
Por PCR en tiempo real se detectó la expresión de MRP4, MRP5 y MRP8, y por
western blot la expresión MRP4. Estos resultados indican que los MRPs regulan
los incrementos de AMPc en células AR42J favoreciendo su salida, sugiriendo que
la extrusión a través de dichos transportadores puede ser un mecanismo
adicional en la regulación de los niveles de AMPc en este sistema, más aún la
alteración en la respuesta a ligandos clásicos asociados a incrementos intracelulares
de AMPc sugieren que el metabolismo de dicho nucleótido se encuentra alterado
en células tumorales respecto de acinos pancreáticos normales.