Cambios en neurofilamentos NF200 y NF160 en cultivos organotípicos de hipocampo y corteza de rata sometidos a hipoxia.

KRUSE, M.S; REY, M.; VELEIRO, A.S.; BURTON, G.; COIRINI, H.

Instituto de Biología y Medicina Experimental

Congreso; XI Jornadas anuales de la Sociedad Argentina de Biología; 2009

Sociedad Argentina de Biología.

Estudios previos in vivo han demostrado alteraciones neuronales por efecto de una asfixia. En el presente trabajo estudiamos el efecto de una hipoxia ‘in vitro’ sobre la expresión de los neurofilamentos NF-200 y NF-160 por Western Blot, evaluando además el efecto del pre-tratamiento con alopregnanolona (Alo) y un análogo sintético, Ns1, sobre los cambios producidos. Resultados: 1 h de hipoxia provocó una disminución significativa de los NF-160 (42.3% p<0.005) en corteza y de NF-200 (31.3% p<0.05) en hipocampo. También presentó una tendencia no significativa a disminuir los NF-160 en hipocampo (18.2%) por hipoxia. No se observaron cambios en los NF-200 de corteza. Para evaluar la capacidad neuroprotectora de Alo o Ns1, se trataron los cultivos con dichos compuestos durante 24 h antes de someterlos a hipoxia y durante la hora de hipoxia. En corteza Alo (5 mM) atenuó la disminución de NF-160 provocado por la hipoxia, mientras que Ns1 (5 mM) revirtió dicha disminución (p<0.05). En hipocampo  tanto Alo como Ns1 atenuaron la disminución de NF-200 inducido por hipoxia, pero en forma no significativa. Estos resultados sugieren que Alo o Ns1 previenen o atenúan el deterioro axonal desencadenado por hipoxia (UBACYT M012 y PICT727). In vivo studies have revealed that hypoxia induced long term neuronal and glial changes. Here we studied the effect of in vitro hypoxia on the integrity of the 160 and 200 kDa neurofilament isoforms (NF-160, NF-200) by immunoblot. We also evaluated the effect of steroid treatments (allopregnanolone (Allo) or its synthetic analogue, Ns1) on the changes observed by hypoxia. Results: 1 h hypoxia significantly decreased cortical NF-160 (42.3% p<0.005) and hippocampal NF-200 (31.3% p<0.05). NF-160 had an slight non-significant decreased in hippocampus (18.2%) while there were no changes in cortical NF-200 by hypoxia. To evaluate the neuroprotection properties of Allo or Ns1, the cultures were treated with these steroids 24 h prior to hypoxia and during the time of hypoxic insult. In cortex, Allo (5 mM) slightly attenuated NF-160 decreased induced by hypoxia, while Ns1 (5 mM) completly reverted NF-160 decreased (p<0.05). In hippocampus both Allo and Ns1 attenuated the NF-200 hypoxic decreased but the effect was not significant. These results suggest that Allo and Ns1 could prevent or attenuate the axonal damage triggered by hypoxia (UBACYT M012 y PICT727).