EFECTO DE LA INHIBICIÓN DE LA VÍA DE NOTCH EN CÉLULAS EPITELIALES MAMARIAS BOVINAS MAC-T

CHIMENTO, A; BONADEO, NADIA; CRISTINA, C.; PERRONE, S; ISABEL MARIA LACAU

Pergamino

Jornada; VI Jornadas de Jovenes Investigadores de la UNNOBA; 2019

UNNOBA

EFECTO DE LA INHIBICIÓN DE LA VÍA DE NOTCH EN CÉLULAS EPITELIALES MAMARIAS BOVINAS MAC-TEn trabajos previos describimos la participación de la vía de señalización Notch en el desarrollo puberal de la glándula mamaria bovina, con un posible rol de esta vía en la proliferación celular y la angiogénesis ocurrida en esta etapa. En concordancia con esto observamos que los cuatro receptores Notch de mamíferos se expresaban en las células epiteliales mamarias bovinas MAC-T, así como los ligandos y targets de la vía, determinando así la expresión basal de la vía Notch en estas células.En el presente trabajo nos propusimos estudiar el efecto de la inhibición por DAPT de la vía de señalización Notch en las células mamarias MAC-T.Las células fueron crecidas en medio 50% DMEM y 50% RPMI con 10% SFB, insulina 5 ug/ml,hidrocortisona 5 ug/ml, glutamina 1% y penicilina/estreptomicina 1% a 37°C en una atmósfera de 5% de CO2. Fueron plaqueadas en medio reducido en suero (5%) y tratadas a las 24, 48 y 72 hs con el inhibidor de la vía Notch, DAPT.Mediante Western blot determinamos la expresión de los receptores NOTCH1, 2, 3 y 4 con una disminución significativa del receptor NOTCH4 en las células tratadas con DAPT a las 72hs (p=0,046). Mediante esta técnica medimos la expresión del gen diana HES1, observando una tendencia a disminuir con el tratamiento de 48 hs (p