Asociación de CRISP3 al espermatozoide humano y su comportamiento durante la capacitación

WEIGEL MUÑOZ M; BATTISTONE MA; ERNESTO JI; MALDERA JA; COHEN DJ; CUASNICÚ PS

Buenos Aires, Argentina

Jornada; XI Jornadas Multidisciplinarias de la Sociedad Argentina de Biología (SAB); 2009

Sociedada Argentina de Biología

<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> Evidencias de nuestro grupo indican que la proteína epididimaria CRISP1 y testicular CRISP2 presentes en el espermatozoide, participarían en el proceso de fertilización en roedores y humano. Con el fin de  investigar si la proteína de plasma seminal humano CRISP3 cumple algún rol en este proceso, analizamos la asociación de la misma al espermatozoide humano como así también su comportamiento durante la capacitación. Para ello, espermatozoides humanos fueron sometidos a diferentes tratamientos, evaluándose la permanencia de CRISP3 por Western blot e inmunofluorescencia. Los resultados mostraron la presencia de dos bandas de 31kDa y 29kDa correspondientes a las formas glicosilada y no glisosilada de CRISP3 en extractos proteicos de espermatozoides frescos. Mientras la proteína correspondiente a la banda de 31kDa fue removida por lavado con PBS, la proteína de 29kDa permaneció en las células luego del tratamiento con 0,6M NaCl y fue  totalmente extraída por 1% Tritón X-100. La banda de 29kDa también se encontró presente en extractos de espermatozoides capacitados y reaccionados,  detectándose marca fluorescente en el acrosoma y cola de los capacitados y en el segmento ecuatorial de los reaccionados. La fuerte unión de CRISP3 al espermatozoide y su permanencia luego de la capacitación y reacción acrosomal apoyan la participación de esta proteína en el proceso de fertilización.