Regulación de la Expresión de p15 y VEGFA por TGF-beta1 en Células de Leydig del Hámster Dorado (Mesocricetus auratus)

GONZALEZ CANDELA; CALANDRA RS; GONZALEZ-CALVAR SI

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LIII reunion Cientifica Anual SAIC-SAFIS; 2008

SAIC-SAFIS

Regulación de la Expresión de p15 y VEGFA por TGF-b1 en Células de Leydig del Hámster Dorado (Mesocricetus auratus) Gonzalez C1, Calandra RS1,3, Gonzalez Calvar, SI1,2 1Instituto de Biología y Medicina Experimental IBYME-CONICET, 2Facultad de Medicina, UBA, 3Instituto Multidisciplinario de Biología Celular, La Plata El Factor de Crecimiento Transformante beta1TGF-beta1 cumple un rol importante en la modulación de la función testicular regulando la expresión de genes vía su receptor TGF-betaRII el cual induce el reclutamiento de los receptores ALK-1 y/o ALK-5, para desencadenar la transducción intracelular de la señal por diferentes vías: Smads, MAPKs (p38). Objetivos: detectar la presencia de Alk1 y 5 por imunohistoquimica y analizar por RT-PCR la expresión de p15 (inhibidor de CDK4) y el Factor de Crecimiento del Endotelio Vascular A (VEGFA) en respuesta a TGF-beta1 (1ó10ng/ml) en ausencia o presencia de U0126 (inhibidor de ERK1/2, 10 uM), SB203580 (inhibidor de p38, 40 uM) y  SB431542 (inhibidor de ALK-5, 1 uM) en cultivos de células de Leydig (CL) purificadas de hámsteres adultos (90 días). Se detectaron ALK1 y 5 en citoplasma de CL. La incubación “in vitro” de CL con TGF-beta1 (1ng/ml) en presencia de hCG (100 mU/ml) aumentó la expresión de VEGFA a las 3 hs de incubación (p<0.05), la cual disminuyó por acción de U0126 (p<0.05). SB203580 no produjo modificaciones en los niveles de VEGFA. La expresión de p15 fue estimulada a los 5 minutos de incubación con TGF-beta1 (10ng/ml) (p<0.05), efecto que fue inhibido por SB203580 (p<0.05). U0126 no produjo cambios en la expresión de p15, mientras que SB431542 inhibió el efecto estimulatorio de TGF-beta1 sobre la expresión de p15 mientras que no tuvo efecto sobre los niveles de VEGFA. Estos resultados sugieren que TGF-beta1 estimularía los niveles de expresión de p15 vía su receptor ALK-5, y que p38 participaría de este efecto, mientras que ERK1/2 participaría en la estimulación de la expresión de VEGFA y podría involucrar al receptor ALK-1 debido a que no se observaron cambios en presencia de SB431542. En conclusión, TGF-beta1 regularía la expresión de genes a través de sus receptores específicos ALK-1 y ALK-5 y por acción de MAPKs, pudiendo existir un mecanismo de interrelación entre ambas vías de señalización en CL de hámsteres Dorados adultos. El