El Factor de Necrosis Tumoral Alfa Transactiva a ErbB2 en c¨¦lulas de c¨¢ncer de mama

RIVAS MA; TKACH, MERCEDES; BEGUELIN W; PROIETTI CJ; ROSEMBLIT C; SUNDBLAD, VICTORIA; DÍAZ FLAQUÉ, CELESTE; CHARREAU E.H; ELIZALDE PV; SCHILLACI R

Mar del Plata

Congreso; SAIC; 2008

  Previamente demostramos que el TNF¦Á induce la proliferaci¨®n del adenocarcinoma mamario murino C4HD a trav¨¦s de la activaci¨®n de la quinasa Akt y el factor de transcripci¨®n NF-¦ÊB. Dado que este tumor sobreexpresa ErbB2 y que el mismo cumple un papel cr¨ªtico en la proliferaci¨®n de las c¨¦lulas C4HD, nosotros hipotetizamos que podr¨ªan existir interacciones entre el TNF¦Á y ErbB2. Nuestros hallazgos muestran que el tratamiento de las c¨¦lulas C4HD con el inhibidor de ErbB2, AG825, bloque¨® la proliferaci¨®n inducida por el TNF¦Á. Resultados similares se obtuvieron utilizando la l¨ªnea celular de c¨¢ncer de mama humano SKBR3, ampliamente utilizada en el estudio de la sobreexpresi¨®n de ErbB2. Adem¨¢s, el TNF¦Á indujo un aumento en la fosforilaci¨®n en tirosina de ErbB2 en c¨¦lulas C4HD y SKBR3, en particular en los residuos Tyr 927/877 y 1272/1222. Luego estudiamos si la quinasa c-Src estaba involucrada en el efecto mencionado, dado que est¨¢ reportado que es capaz de fosforilar a ErbB2 en el residuo Tyr877/927. Observamos que la adici¨®n de PP2, un inhibidor de la familia de Src, inhibi¨® completamente la fosforilaci¨®n de ErbB2 en Tyr927/877, y parcialmente la de Tyr 1172/1222. La c-Src activada por TNF¦Á fue capaz de fosforilar in vitro a ErbB2 en Tyr 927. Tambi¨¦n observamos que la estimulaci¨®n con TNF¦Á indujo la asociaci¨®n entre ErbB2 y ErbB3, y la uni¨®n de la subunidad p85 de PI3-K a ErbB3. El tratamiento con AG825 inhibi¨® la activaci¨®n de Akt y NF-¦ÊB por TNF¦Á como se evidenci¨® mediante western blots y ensayos de gen reportero. Estos resultados muestran por primera vez que el TNF¦Á es una citoquina capaz de transactivar a ErbB2 a trav¨¦s de la activaci¨®n de c-Src. Adem¨¢s demostramos que la activaci¨®n de Akt y de NF-¦ÊB inducida por TNF¦Á requiere de la fosforilaci¨®n de ErbB2 en c¨¦lulas de c¨¢ncer de mama que sobreexpresan ErbB2.