La inmunización génica con proacrosina bloquea la fertilidad de ratones macho

GARCÍA, L.; VEAUTE, C.; LUSTIG, L.; VAZQUEZ-LEVIN, M.H.

Instituto de Biología y Medicina Experimental. Buenos Aires.

Congreso; X Jornadas de la Sociedad Argentina de Biología; 2008

Sociedad Argentina de Biología

Acrosina es una serin-proteasa acrosomal con funciones clave en la fecundación. Previamente, demostramos que la inoculación del ADNc de proacrosina genera una respuesta inmune en ratones hembra. En este estudio se evaluó la respuesta humoral frente a la inmunización génica con proacrosina en ratones macho y sus efectos sobre la fertilidad. Ratones Balb/c machos fueron inoculados (i.m., 5 dosis, 1 cada 3 semanas) con un vector de expresión eucariota que expresa el ADNc de proacrosina bajo el control del promotor del CMV (50µg/dosis; control: plásmido sin inserto). Los animales inmunizados mostraron niveles elevados de anticuerpos específicos (ELISA). Los ratones con niveles de anticuerpos que superaron 4 veces el valor preinmune fueron infértiles. No se detectaron alteraciones histológicas en los testículos, ni variaciones en el #, motilidad o % de reacción acrosomal (RA) inducida por ionóforo de Ca++. Sueros inmunes inhibieron la RA inducida en espermatozoides normales (% RA: 18±2 vs 75±2; p<0,05). Conclusión: La inmunización génica con proacrosina induce una respuesta humoral específica que se asocia con infertilidad, que podría relacionarse con inhibición de la RA. Versión en Inglés (como será publicado en Biocell) Introduction: The sperm serine protease Acrosin plays several key roles on sperm function during fertilization. Our group has demonstrated the ability of proacrosin cDNA injection to induce an immune response in female mice. This study assessed the humoral response of male mice to gene immunization with proacrosin and its effect upon fertility. Methods: Male Balb/c mice were inoculated (i.m.; 5 times; 3 weeks apart) with an eukaryotic expression vector, containing proacrosin cDNA under CMV transcription control (pSF2-Acro, 50µg/dose; control:plasmid without insert). Results: Immunized mice exhibited high titers of antibodies towards proacrosin (ELISA). After mating with fertile female mice, all mice with anti-proacrosin antibodies levels higher than 4 times the preimmune value were infertile. Antibody levels were not associated to histological changes in the testis, or alterations in sperm # motility or A23187 Ca++ ionophore-induced acrosome reaction (AR). Immune sera inhibited induced AR in control spermatozoa (% AR: 18±2 vs 75±2; p<0.05). Conclusion: Gene immunization of male mice towards proacrosin induced a humoral response that was associated to a reduced fertility. This could be attributed, at least in part, to inhibition of AR.