Participación de cadherina epitelial en la formación del reservorio espermático oviductal en bovinos

CABALLERO, J.N.; PÉREZ-MARTÍNEZ, S.; GERVASI, M.G.,; CÉTICA, P.D.; VAZQUEZ-LEVIN, M.H.

Instituto de Biologia y Medicina Experimental. Buenos Aires. Argentina

Congreso; X Jornadas de la Sociedad Argentina de Biología; 2008

Sociedad Argentina de Biología

Introducción: El reservorio oviductal está constituido por Células Epiteliales Oviductales (CEO) que interactúan con espermatozoides de alta capacidad fecundante, que son liberados durante la ovulación. La Cadherina epitelial (CadE) es una molécula de adhesión homotípica dependiente de iones calcio, anclada al citoesqueleto de actina por β-catenina (β-cat). Objetivos /Metodología: 1) Caracterizar la localización de CadE y β-cat en CEO y en espermatozoides adheridos y liberados de las CEO (inmunocitoquímica) 2) Evaluar la participación de CadE en la formación del reservorio oviductal (ensayos de competencia de interacción con anticuerpos anti CadE). Resultados: CadE y β-cat fueron inmunodetectadas en las CEO y en espermatozoides. La presencia del anticuerpo anti CadE DECMA-1 condujo a una disminución (p<0,001) del # de espermatozoides unidos a las CEO in vitro (% inhibición: 61–94%). Los espermatozoides liberados del co-cultivo por agregado de heparina perdieron la señal para CadE y β-cat en el capuchón acrosomal, similar a lo observado en espermatozoides capacitados en medio definido. Conclusiones: CadE participaría en la formación del reservorio oviductal, por adhesión entre las CEO y la región acrosomal espermática; la liberación estaría relacionada con cambios en la localización de CadE asociados a la capacitación mediada por heparina. En inglés (a ser publicado en Biocell) Introduction: After mating, spermatozoa with high fertilizing ability are selected by cell-cell interaction with the Oviductal Epithelial Cells (CEO) until ovulation occurs. Epithelial cadherin (E-cad) is a homophillic calcium-dependent cell-cell adhesion molecule, anchored to the actin cytoskeleton through β-catenin (β-cat). Objectivs: 1) To characterize E-cad and β-cat localization in both interacting cells and in spermatozoa released from the interaction, 2) To evaluate the participation of E-cad in the sperm-CEO interaction. Methodology: Localization studies were carried out by immunocytochemistry, and the role of E-cad in the interaction was evaluated by competition assays in the presence of specific anti E-cad antibodies. Results: E-cad and β-cat were immunodetected in CEO and adhering spermatozoa. The presence of DECMA-1 anti E-cad antibody caused a significant (p<0.001) decrease in the number of sperm bound to CEO cultures. In spermatozoa released from CEO, the signal for E-cad and β-cat was lost in the acrosomal cap. Same results were obtained after sperm incubation under capacitating conditions in a defined medium. Conclusions: E-cad would participate in the formation of the oviductal sperm reservoir by interaction of the acrosomal cap with the CEO. The release may involve the loss of E-cad in the acrosomal cap after capacitation in the presence of heparin.