Efectos del lipopolisacárido bacteriano (LPS) sobre la actividad y los niveles de expresión de la ciclooxigenasa-2 y la producción de esteroides en células adrenales Y1. Posible rol de NFKB

MARTÍNEZ CALEJMAN CAMILA; ASTORT FRANCISCO; DI GRUCCIO JULIÁN; REPETTO ESTEBAN; CIPELLI JM; MERCAU MARTÍN; ARIAS PABLO; PIGNATARO OMAR P; CYMERYNG CORA

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

EFECTOS DEL LIPOPOLISACÁRIDO BACTERIANO (LPS) SOBRE LA ACTIVIDAD Y LOS NIVELES DE EXPRESIÓN DE LA CICLOOXIGENASA-2 Y LA PRODUCCIÓN DE ESTEROIDES EN CÉLULAS ADRENALES Y1: POSIBLE ROL DE NFKB El aumento en los niveles de glucocorticoides durante el proceso inflamatorio experimental inducido por LPS ha sido atribuido principalmente a sus acciones sobre niveles superiores del eje hipotálamo-hipófiso-adrenal. Sin embargo, existen evidencias de efectos directos ejercidos por el LPS sobre células adrenales. Objetivos: Analizar el efecto del LPS sobre la producción de esteroides en células adrenales Y1 y estudiar el mecanismo de recepción/transducción de señales involucrado. Resultados: Esta línea celular murina expresa receptores Toll-like 4 (TL4) (RTPCR). Células Y1 transfectadas con un plásmido reportero de luciferasa con un elemento de reconocimiento de NFêB mostraron, tras la estimulación con LPS (10 μg/ml), un aumento en la actividad de dicha enzima (Control: 0,88 ± 0,10; LPS: 2,00 ± 0,09; p<0,0001; media ± SD; test Wilcoxon). Este tratamiento indujo además un aumento en la producción de progesterona; dicho efecto fue reducido por la co-incubación con un inhibidor de la actividad de IKK (IKK-Inh) (Control: 46,3 ± 2,3; LPS: 93,0 ± 7,4; IKKInh: 46,9 ± 2,7; LPS + IKK-Inh: 67,0 ± 4,0 ng/ml; Control vs LPS p< 0.001; LPS vs LPS + IKK-Inh, p< 0,01; ANOVA). La expresión de ciclooxigenasa 2 aumentó (COX-2; western blot) tras el tratamiento con LPS. El aumento en los niveles de progesterona inducido por LPS fue inhibido significativamente por indometacina y diclofenac (inhibidores no selectivos) y por parecoxib (inhibidor selectivo de COX-2). Conclusión: Los Resultados indican que el LPS estimula directamente la producción de esteroides por las células adrenales Y1. El receptor de membrana TL4 está presente en dichas células y la incubación de las mismas con LPS resulta en la activación de la vía de NFkB, y la inducción de genes específicos. Entre éstos, demostramos un aumento en los niveles de expresión de COX-2. Por último, la actividad de esta enzima parece ser relevante para el incremento de la esteroidogénesis inducido en estas células por LPS.