Efecto in vitro de compuestos beta-adrenergicos en la linea tumoral mamaria humana MDA-MB-231

PEREZ PIÑERO CECILIA; BRUZZONE A; CASTILLO L; LUTHY I

Mar de Plata

Congreso; LII Reunion Cientifica Anual de SAIC; 2007

Sociedad Argentina de Investigaion Clinica

Previamente describimos un efecto proliferativo de agonistas a2-adrenérgicos en líneas tumorales mamarias humanas y murinas. El rol de los compuestos b-adrenérgicos aun no había sido completamente elucidado. El objetivo de este trabajo fue analizar su efecto in vitro en la línea tumoral mamaria humana MDA-MB-231. Se realizó inmunofluorescencia en microscopio confocal con anticuerpos específicos comerciales. Para el ensayo de proliferación, se incubaron las células con el compuesto adrenérgico en medio suplementado con 2% SFBA, con cambios de medio cada 24 hs durante 3 días. El último día se agregó la Timidina tritiada. Las células se cosecharon y se contó la radiactividad en un contador Beta. Por inmunofluorescencia en microscopio confocal detectamos tinción positiva para b2-RA y a2B-RA en estas células. Al analizar el efecto del ligando endógeno epinefrina (EPI), se observó un efecto estimulatorio significativo de la incorporación de [3H]-Timidina. Por ejemplo: EPI 0.1nM: 124,3 ± 8,2% respecto del control (p<0.05) y 1 nM: 138.7±7% (p<0.01). Considerando que la EPI se une a b2-RA y a2-RA, utilizamos entonces el agonista b-adrenérgico isoproterenol (ISO) para elucidar este efecto. En este caso también se observó una estimulación del crecimiento celular estadísticamente significativa. Ejemplos: ISO 10nM: 133.6±7.7% respecto al control (p<0.05); ISO 100 nM 151,6±5,4% (p<0.01). Por otro lado, al bloquear la acción de EPI sobre los receptores b-adrenérgicos utilizando el antagonista b propanolol, no se observó una reversión del efecto sobre la proliferación. Este hecho podría deberse a que los a2-RA también median un efecto proliferativo. A partir de estos resultados se puede concluir que en las células MDA-MB-231 tanto los receptores a y b-adrenérgicos poseen efectos mitogénicos. Este efecto es opuesto a otras líneas celulares, en las que los receptores alfa2-RA estimulan y los beta2-RA inhiben la proliferación celular.