Inmunotección de cadherinas epitelial y neural en el complejo ovocito cumulus bovino

ARZONDO, MM; CABALLERO, JN; MARIN BRIGGILER, CI; DALVIT, G; GUTNISKY, C; CETICA, P; VAZQUEZ LEVIN, MH

INITRA Facultal de Ciencias Veterinarias UBA

Congreso; Segundas Jornadas Internacionales del Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; 2010

INITRA

Introducción: La fecundación involucra eventos de adhesión entre las gametas. Cadherina epitelial (cad-E) y cadherina neural (cad-N) son glicoproteínas de membrana que participan en la adhesión celular preferentemente por interacción homofílica (del mismo tipo). Estudios previos de nuestro grupo han descripto la presencia y localización de ambas proteínas en espermatozoides y ovocitos humanos y presentaron evidencias sobre su participación durante la fecundación (Marín-Briggiler/Veiga et al, 2008; Marín-Briggiler et al, 2010). Asimismo, ambas moléculas de adhesión han sido inmunolocalizadas en el espermatozoide bovino, en regiones subcelulares involucradas en la interacción con el ovocito (Caballero et al, J Androl, 2006; Arzondo et al, Biocell, 2010). Hipótesis: cad-E y cad-N se encuentran en el complejo ovocito cumulus (COC), en estructuras involucradas en la interacción con el espermatozoide. Objetivo: Determinar la presencia, formas proteicas y localización celular de cad-E y cad-N en componentes del COC bovino. Materiales y Métodos: Se analizaron ovocitos y células del cumulus provenientes de COCs inmaduros y madurados in vitro. Se realizaron ensayos de “Western inmunoblotting” e inmunocitoquímica utilizando anticuerpos específicos de cad-E y cad-N (Santa Cruz Biotech). Resultados: La forma proteica completa de cad-E (120 kDa) y cad-N (135 kDa) fue identificada en extractos proteicos de células del cumulus y de ovocitos inmaduros y madurados in vitro con zona pellucida (ZP). En inmunocitoquímica, la ZP presentó una señal específica para ambas proteínas, principalmente en estructuras que corresponderían a proyecciones de las células del cumulus, de mayor intensidad en COCs inmaduros. Ambas proteínas fueron inmunolocalizadas en la membrana plasmática de ovocitos y de células del cumulus provenientes de COCs inmaduros y madurados in vitro. Conclusión: Los hallazgos presentados, en conjunto con resultados previos en los espermatozoides, permiten sugerir la participación de cad-E y cad-N en eventos de adhesión celular durante la interacción de gametas en el modelo bovino. Marín-Briggiler*, Veiga* et al. Mol Hum  Reprod. (2008)4:561-71.  (*) igual contribución. Marín-Briggiler, et al. Int J Androl (2010)33:e228-39. Caballero et al. J. Androl. Marzo /Abril 2006. Arzondo et al. Biocell (2010).