Evaluación de la expresión de cadherina epitelial y moléculas asociadas en un modelo murino de cáncer de vejiga.

LAPYCKYJ, L; LODILLINSKY, C; GIUSTINA, S; EIJAN, AM; VAZQUEZ LEVIN MH

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XXVI Jornadas de Oncología del Instituto"Ángel H. Roffo".; 2010

Instituto de Oncologia Angel Roffo

Introducción: La transición epitelio-mesenquimal (TEM) tendría un rol en la invasión y metástasis del cáncer de vejiga, si bien las bases moleculares no han sido completamente dilucidadas (McConkey et al, 2009). Un evento característico de este proceso es la pérdida de la adhesión célula-célula asociada a alteraciones en la expresión de cadherina epitelial (cadE). En un estudio reciente, Eiján y colaboradores describieron una nueva línea celular de cáncer de vejiga, MB49-I; ésta presenta un aumento de propiedades invasivas y metastásicas respecto de la línea parental MB49, así como la expresión de marcadores de la TEM, MMP9 y vimentina (Lodillinsky et al, 2009). Objetivo: Evaluar la expresión de cadE y moléculas asociadas a la regulación de su expresión y funciones (ß-catenina, cadherina neural (cadN), Twist, Snail y disadherina) en las líneas celulares MB49 y MB49-I. Materiales y Métodos: Se emplearon estrategias de análisis de transcripto (RT-PCR, qPCR) y proteínas (Western immunoblotting, inmunocitoquímica). Resultados: 1) Se determinó la presencia de bajos niveles del transcripto de cadE en ambas líneas celulares, observándose una disminución del 30% en las células MB49-I respecto de las parentales. La forma completa de la proteína de adhesión fue detectada en bajos niveles en los lisados totales de MB49 y no se observó señal para cadE en los de MB49-I. 2) Los niveles de expresión de ß-catenina fueron similares en ambas líneas celulares. 3) Se detectaron bajos niveles del ARNm del factor de transcripción Twist en ambas líneas. 4) Contrastando, se determinó un aumento del 31% en los niveles de expresión del factor de transcripción Snail en las células MB49-I respecto de las MB49. 5) Tanto en las células MB49 como en las MB49-I, los niveles del ARNm de cadN fueron mayores que los de cadE (# veces: MB: 60; MBI: 9,6). 6) En ambas líneas, se identificaron altos niveles de expresión de disadherina. Esta proteína ha sido caracterizada como un modulador negativo de cadE en tumores humanos. Conclusiones: Los estudios revelan una disminución en los niveles de cadE y un aumento en los del factor represor de transcripción Snail en las células MB49-I respecto de las MB49. Los resultados son consistentes con los reportados en la literatura para tumores de vejiga humanos, en los que las alteraciones de cadE han sido relacionadas con la invasión y la metástasis (Baumgart et al, 2007). Asociados a los bajos niveles de cadE, se determinaron altos niveles de cadN; el aumento en la proporción cadN/cadE ha sido asociado a un mayor potencial invasivo de las células de carcinoma de vejiga (Lascombe et al, 2006). Conjuntamente, se detectaron altos niveles de disadherina, siendo éste el primer reporte sobre su expresión en el cáncer de vejiga. Las similitudes de los resultados obtenidos con los descriptos para los tumores de vejiga humanos hacen, de este modelo, una herramienta útil para el estudio de moléculas de adhesión implicadas en la progresión del cáncer de vejiga. Referencias: McConkey et al, Cancer Metastasis Rev. 2009;28(3-4):335-44. Lodillinsky et al, J Urol. 2009;182(2):749-55. Baumgart et al, Clin Cancer Res. 2007;13(6):1685-94. Lascombe et al, Clin Cancer Res. 2006;12(9):2780-7.