Participación del zinc en la asociación de CRISP1 al espermatozoide de rata durante la maduración epididimaria

VASEN G; MALDERA JA; WEIGEL MUÑOZ M; COHEN DJ; CUASNICÚ PS

Buenos Aires

Jornada; XII Jornadas Multidisciplinarias de la Sociedad Argentina de Biología (SAB); 2010

Sociedad Argentina de Biología (SAB)

Resultados previos de nuestro laboratorio  indican que el Zinc (Zn2+) estaría involucrado en la asociación de la proteína epididimaria CRISP1 a la superficie del espermatozoide durante la maduración. En base a ello, el objetivo del presente trabajo consistió en investigar el mecanismo molecular por el cual el Zn2+ participa en dicha asociación. Experimentos de citometría de flujo utilizando CRISP1 biotinilada confirmaron el requerimiento del catión para la unión de la proteína a espermatozoides del caput epididimario. Posteriores estudios de localización por microscopía de fluorescencia revelaron la asociación de CRISP1 al flagelo de espermatozoides del caput y a la cola y cabeza de células del cauda. Mientras el análisis del espectro de fluorescencia del triptofano no evidenció cambios conformacionales en CRISP1 luego de su exposición a Zn2+, ensayos de electroforesis en condiciones nativas, revelaron la formación de complejos de alto peso molecular luego de la incubación de CRISP1 con el catión. Dichos complejos también fueron detectados en fluido epididimario y no se encontraron presentes en muestras pre-tratadas con EDTA. En conjunto, estos resultados sugieren la participación de un complejo molecular formado por CRISP1 y Zn2+ en la asociación de la proteína al espermatozoide durante la maduración epididimaria.