BACTERIAS PATAGÓNICAS PARA EL TRATAMIENTO ANTIENCOGIMIENTO DE LANA MERINO Y EL REEMPLAZO DE UN PROCESO INDUSTRIAL CONTAMINANTE

MARTÍN IGLESIAS; CYNTHIA SEQUEIROS; SEBASTIÁN GARCÍA; NELDA LILA OLIVERA

Buenos Aires

Congreso; CAMAYA 2015; 2015

Asociación Argentina de Microbiología

En el marco de la política nacional para promover la transformación de conocimientos científicos en competencias tecnológicas se realizó un programa de selección de bacterias productoras de enzimas queratinolíticas extracelulares con potencial para el desarrollo de tratamientos antiencogimiento de lana Merino. Las escamas superficiales de la fibra de lana son las principales responsables de su encogimiento en los procesos de lavado. Las enzimas queratinolíticas son capaces de descamar la superficie de dicha fibra y así ser utilizadas en el desarrollo de tratamientos antiencogimiento no contaminantes. El actual tratamiento industrial utilizado para conferir resistencia al encogimiento a la fibra de lana es un método químico (cloración Hercosett) que produce compuestos orgánicos halogenados absorbibles e insume grandes cantidades de agua y energía. En estudios previos se aisló de lana Merino Patagónica la cepa Bacillus sp. G51 con importante actividad queratinolítica sobre lana. El objetivo del presente estudio fue caracterizar la actividad proteolítica extracelular de la cepa Bacillus sp. G51, considerando su potencial aplicación en el tratamiento antiencogimiento de lana. Se analizaron los sobrenadantes de cultivos en un medio con leche descremada como sustrato de crecimiento (1%) luego de 72 hs de incubación a 30°C y 200 rpm. La actividad proteolítica se determinó empleando caseína como sustrato (1 % p/v en la mezcla de reacción),utilizando buffer TRIS-HCl 0,1 M (pH 8) e incubando a 45°C. Se determinaron la temperatura y pH óptimos, y el efecto de inhibidores (1,10-Fenantrolina, EDTA, PMSF) y sales de calcio y zinc sobre la actividad proteolítica. El perfil proteico de los sobrenadantes, concentrados con 3 volúmenes de acetona, se analizó mediante SDS-PAGE y Zimograma, y Espectrometría de Masas de tipoElectrospray (ES/MS). El extracto enzimático crudo presentó máxima actividad a una temperatura de 60 ºC y pH 9. La actividad del extracto crudo disminuyó un 65,3 % en presencia del inhibidor de proteasas serínicas PMSF (10 mM). A su vez, la actividad del extracto crudo fue inhibida 67,8 y 62,2 % por EDTA (10 mM) y 1,10-Fenantrolina (10 mM), respectivamente. Estos resultados sugirieron una mezcla de proteasas serínicas y metaloproteasas en el extracto crudo. Por otra parte, la incubación del extracto con iones Ca++ incrementó levemente la actividad (4 %), mientras que con Zn++ disminuyó 20 %. En el zimograma se detectaron tres bandas con actividad proteolítica. Mediante ES/MS se determinó que 5 péptidos resultantes de la digestión tríptica de la banda con mayor actividad proteolítica coincidieron con la peptidasa M32 de Bacillus mojavensis(WP_010334679.1); una metaloproteasa. La caracterización de la actividad proteolítica de G51 aportó información de base necesaria para el futuro diseño de un tratamiento antiencogimiento de lana Merino que deberá contemplar los parámetros óptimos de actividad obtenidos y la adición de iones Ca++.