LA GEMCITABINA INDUCE AUTOFAGIA MEDIADA POR VMP1 Y PROMUEVE LA MUERTE POR APOPTOSIS DE CELULAS DE CANCER DE PANCREAS.

PARDO R; LO RE A; MOLEJÓN, MI; ROPOLO A; PAPADEMETRIO DL; GONZALEZ, CD; ALVAREZ EM; IOVANNA, JL; VACCARO, MI

Mar del Plata, Argentina.

Congreso; LIV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La autofagia es un proceso de degradación de componentes citoplasmáticos. En cáncer, la autofagia puede jugar un rol citoprotectivo o puede llevar a la muerte celular. Poco se conoce acerca del rol de la autofagia en el cáncer pancreático. Nuestro objetivo consistió en analizar la participación de la autofagia en la muerte de células de cáncer pancreático inducida por gemcitabina, la droga estándar para el tratamiento del cáncer de páncreas. En este estudio demostramos que la gemcitabina induce autofagia en las líneas tumorales pancreáticas PANC-1 y MIAPaCa-2. Este resultado fue evidenciado por la acumulación de organelas acídicas, el aumento (p<0,05) del reclutamiento de LC3 (microtubule-associated protein-1 light-chain-3) y la presencia de ultraestructura de autofagia luego de 8h de tratamiento con gemcitabina 200 uM. Este agente quimioterapéutico también indujo la muerte celular por apoptosis, detectada por morfología, aumento (p<0,05) del porcentaje de células anexina V positivas y clivado de caspasa 3 luego de 24h. Sorprendentemente, el tratamiento con 3-Metiladenina (3-MA), un inhibidor de la autofagia, disminuyó significativamente la apoptosis. En estudios previos se determinó que la proteína VMP1 (Vacuole Membrane Protein 1) induce la autofagia en células de mamíferos. Con el objeto de determinar si la expresión de VMP1 esta involucrada en el mecanismo por el cual la gemcitabina induce autofagia, se realizaron ensayos de Real Time PCR. Los resultados mostraron que el tratamiento con gemcitabina induce la expresión de VMP1 en las células PANC-1 y MIAPaCa-2. La inhibici¨®n de la autofagia mediante el silenciamiento de VMP1, por un shRNA específico, disminuyó (p<0,05) la apoptosis. Más aun, la sobreexpresión de VMP1 en las células tumorales condujo a la muerte por apoptosis. Por lo tanto se demuestra que la vía de autofagia mediada por VMP1 promueve la apoptosis en las células de cáncer de páncreas y media la citotoxicidad inducida por la gemcitabina.