TRANSDUCCIÓN DE LA SEÑAL DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO (GH) DURANTE LA ETAPA DE CRECIMIENTO EN RATONES TRANSGÉNICOS QUE SOBREEXPRESAN GH

SOTELO AI; MATOS M; MIQUET JG; GONZÁLEZ L; TURYN D

Buenos Aires

Congreso; XV Congreso de la Sociedad Argentina de Endocrinología y Metabolismo; 2007

Sociedad argentina de endocrinología y metabolismo

OBJETIVOS: La hormona de crecimiento (GH) es una hormona anabólica que estimula el crecimiento corporal posnatal y el crecimiento longitudinal de los huesos entre sus efectos más importantes, directamente o a través del factor de crecimiento símil insulina (IGF-I). La GH induce la fosforilación de distintos mediadores, entre los cuales los transductores de la señal y activadores de la transcripción (STATs) son los más relevantes para la acción de la GH. La finalización de la señal de GH está dada por la activación de fosfatasas y por la expresión de los supresores de la señal de citoquinas (SOCS). Las proteínas SOCS son inhibidores del complejo receptor para GH activado y, además, son señales para la degradación de este complejo. CIS –supresor inducible de citoquinas- es inhibidor competitivo de la unión de STAT5 al receptor. El hígado es un importante tejido blanco de la GH y es el principal productor endócrino de IGF-I. En ratones transgénicos que presentan elevadas concentraciones de GH la vía de señalización JAK2/STAT5 se encuentra desensibilizada, acompañado por un aumento de la proteína CIS1,2. Sin embargo, el tamaño corporal de estos ratones es 40-70 % mayor que el de los controles, coincidente con el aumento de IGF-I circulante que estos animales presentan. Se desea poder elucidar cómo, a pesar de tener desensibilizada la principal vía de traducción de la GH, los ratones crecen, para lo que se evaluó la activación de la vía JAK2/STAT5 durante el crecimiento en ratones transgénicos. La acción de la GH se manifiesta a partir del destete (3 semanas de vida), cuando los ratones transgénicos crecen a mayor velocidad que los controles. MATERIALES Y MÉTODOS: Se usaron ratones transgénicos PEPCK-bGH, en los que el gen de la hormona crecimiento bovina está fusionado a secuencias promotoras de la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa. Se utilizaron ratones de tres edades distintas: 2, 4 y 10 semanas. Los ratones recibieron una inyección de GH bovina (5 mg/kg) por vía ip, 7,5 minutos después fueron sacrificados para la extirpación de los tejidos. Estos se homogeneizaron en presencia de inhibidores de proteasas y fosfatasas, y de detergente no iónico. Las proteínas involucradas en la traducción de la señal de GH y de su finalización se analizaron por Western-Immunoblot del tejido solubilizado, directamente o previa inmunoprecipitación con anticuerpos específicos. RESULTADOS: Se esperaba encontrar que STAT5 estuviera activado y que CIS estuviera disminuida en ratones transgénicos luego del destete, ya que a esa edad los animales transgénicos crecen más rápido que los controles. STAT5 es el factor de transcripción que se relaciona con la expresión de IGF-I inducido por GH  y con el crecimiento longitudinal. Sin embargo, encontramos: -          que STAT5 no se activa a ninguna de las edades estudiadas en los ratones transgénicos (p<0,01, n=4) -          que el contenido de CIS no varía con la edad en los ratones transgénicos (ns; n=4) -          que la activación de STAT5 es mayor en ratones normales a las 2 semanas de edad (p<0,01, n=4) que en el adulto -          que el contenido de CIS es mucho mayor en los ratones normales en etapa de crecimiento (2 semanas) que en los ratones adultos (p<0,001, n=4) -          CONCLUSIONES: En la “adolescencia” se presenta un aumento pronunciado de la concentración de GH circulante. Los resultados sugieren que el organismo trata de impedir la actividad exagerada de la hormona induciendo la expresión de proteínas encargadas de terminar la señal como forma de moderar el crecimiento marcado característico de esa etapa de la vida. En el animal normal, cuando los valores de GH decaen, también disminuyen los reguladores negativos de su acción. En cambio, en el animal transgénico, donde los niveles elevados son crónicos, los moduladores desensibilizantes están presentes durante toda la vida. Citas bibliográficas: 1- González L, Miquet JG, Sotelo AI, Bartke A, D Turyn. Endocrinology 143(2): 286-294, 2002. 2- Miquet JG, Sotelo AI, Bartke A, Turyn D. Endocrinology 145(6): 2824-2832, 2004.