INVESTIGADORES
SERENA Maria Soledad
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis de la secuencia del gen completo de la proteína VP2 de una cepa local de Parvovirus Porcino
Autor/es:
RODRIGUEZ, MG; GALETTO L; COLINA S; METZ G; CAPPUCCIO J; SERENA M. S; GALLO CALDERON
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Jornada; X Jornadas jóvenes investigadores. FCV-UBA; 2021
Institución organizadora:
FCV-UBA
Resumen:
El Parvovirus porcino (PPV) es uno de los agentes infecciosos más importantes que se asocia a fallas reproductivas en granjas porcinas, provocando reabsorción embrionaria, momificación y/o muerte fetal. En Argentina, como en otros países donde la producción porcina es de importancia económica, las fallas reproductivas causadas por el PPV son un gran problema.El PPV es un virus con genoma ADN monocatenario (cadena negativa) de aproximadamente 5000 nt que contiene dos marcos abiertos de lectura; uno codifica para las proteínas no estructurales y el otro codifica para las tres proteínas de la cápside VP1, VP2 y VP3. La cápside es icosaédrica, no envuelta y está formada por copias múltiples de estas VPs. VP1 y VP2 son traducidas a partir del mismo marco de lectura, pero a partir de diferentes codones de inicio y VP3 es un producto de escisión proteolítica de VP2. En los últimos años, se viene reportando una variación genética entre las cepas de campo y las cepas de referencia y/o vacunales. Además, se sabe que las cepas de PPV se pueden distinguir por su diferente patogenicidad;las sustituciones de unos pocos residuos en la VP2 (D378G, H383Q y S436P), son responsables de las distintas propiedades biológicas entre las cepas NADL-2 y Kresse (vacuna y salvaje, respectivamente).El objetivo de este trabajo fue amplificar por PCR el gen completo de la VP2 de una cepa local y analizar la secuencia respecto de cepas vacunales y de referencias publicadas en el Genbank.A partir del ADN extraído de la cepa autóctona CC7, aislada de un feto porcino proveniente de un establecimiento con problemas reproductivos, se logró realizar la amplificación por PCR del gen VP2 con primers específicos diseñados para tal fin. El fragmento obtenido (1740 nt) fue purificado y clonado en el pGEM®-T Easy Vector. Se realizó la transformación de bacterias E. Coli DH5 competentes y se obtuvo el ADN plasmídico el cual fue secuenciado. La secuencia obtenida muestra un 99.66% de homología con la cepa GD2013 de origen Chino y con las cepas vacunales NADL-2 y POVCAP. Asimismo, el análisis de la secuencia aminoacídica muestra 3 cambios únicos (Q303L, V335G, H440N) y un cambio que se encuentra también en otras cepas salvajes (I321T).Estudios previos realizados en nuestro país, se basan en la detección un fragmento del gen NS1 para el diagnóstico molecular, y la amplificación de un fragmento de 619 bp del gen de la VP2 para la caracterización molecular. En este trabajo, se pudo clonar el gen completo de la VP2 y obtener por primera vez en nuestro país su secuencia completa. Los resultados obtenidos coinciden con lo expuesto por otros autores en lo que respecta a la alta homología detectada entre cepas de campo y vacunales. Estos resultados preliminares ponen en evidencia la necesidad de realizar un análisis más exhaustivo, no sólo de la misma cepa sino de otras nacionales e internacionales para permitir el estudio de la variabilidad genética entre cepas y la posible asociación con los cuadros reproductivos.