Molecular tools for the study of the early steps in the symbiosis Discaria trinervis – Frankia.

IMANISHI L; VAISSAYRE V; VAYSSIERES A; MOUKANGA D; BOGUSZ D; CLAUDINE FRANCHE; WALL LG; SVISTOONOFF S

La Plata

Congreso; XXVIII Reunión Argentina de Fisiología Vegetal; 2010

SAFV

OBJETIVOS. Desarrollar un sistema de transformación genética eficiente para la obtención de raíces transgénicas en Discaria trinervis. Estudiar en las raíces transgénicas de D. trinervis la activación de promotores de genes involucrados en el proceso de nodulación. Comparar la activación de dichos genes entre la vía de infección intercelular presente en D. trinervis y la intracelular de Casuarina glauca. RESULTADOS. Se desarrolló un sistema de transformación ex-vitro en D. trinervis empleando Agrobacterium rhizogenes ARqua1 con una eficiencia de hasta el 80%. Las raíces transgénicas obtenidas resultaron eficientemente noduladas con Frankia BCU110501, dando lugar a una simbiosis fijadora de nitrógeno completamente funcional. El estudio de promotores de genes marcadores de la simbiosis mostró mecanismos conservados (ProCg12 y ProMtENOD11) y no conservados (CgAux1) entre la vía de infección intercelular, presente en Discaria trinervis, y la vía intracelular de Casuarina glauca, dónde los genes habían sido previamente estudiados. CONCLUSIONES El sistema de transformación de Discaria trinervis con Agrobacterium rhizogenes demostró ser altamente eficaz, y permitirá el estudio de la vía de infección intercelular y los mecanismos moleculares involucrados en la interacción de Frankia con plantas actinorrícicas pertenecientes al orden Rosales, poco abordado hasta el momento. Existen mecanismos conservados (Cg12, MtENOD11) y no conservados (CgAUX1) entre las dos vías de infección descritas en la simbiosis actinorrícica.