Detection of immunodominant epitopes using synthetic peptides

DUHALDE VEGA M,; APARICIO, JL; RETEGUI, LA

Buenos Aires, Argentina

Congreso; 3º Congreso latinoamericano de autoinmunidad; 2010

Kenes international

<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> Los ratones infectados con el  MHV-A59 expresan autoanticuerpos (autoAb) dirigidos contra la fumarilacetoacetatohidrolasa (FAH)  de hígado y riñón.. Estos autoAb reconocen tanto epitopes conformacionales como lineales, pero la respuesta autoinmune no se limita a la mimica molecular y/o el “spreading” de epitopes. Nuestro propósito fue analizar la especificidad de estos autoAb. Para esto, se sintetizaron por PEPSCAN las secuencias mas reactivas (N-terminal 1-49 y C-terminal 390-419) como péptidos de 15 aminoácidos desplazados en un residuo. Su reactividad con el suero de animales infectados con MHV se analizó por ELISA RESULTADOS: las secuencias 9-23 y 30-44 de la FAH reaccionaron significativamente con los autoAb. Se delimitaron los epitopes “mínimos” dentro de cada región, los que correspondieron a las secuencias 9-15 (Asp-Ser-Asp-Phe-Pro-Ile-Glu) y la 36-42 (Ile-Gly-Asp-Glu-Ile-Leu-Asp). El análisis mutacional de estos epitopes  demostró que los residuos 9-12 y el residuo 36 son los aminoácidos claves para la unión de los autoAb a cada una de estas regiones. La porción C-terminal, sólo reveló un epitope principal en la secuencia 390-409. En este caso, el epitope mínimo posee 9 aminoácidos correspondientes a la secuencia 396-404 de la FAH. Los datos indican que tanto los epitopes mínimos, como los aminoácidos claves para la unión de los autoAb carecen de su contraparte en las proteínas virales. Sin embargo, la localización de estos residuos en la estructura terciaria de la enzima origina un epitope conformacional, el cual podría presentarse en cualquier proteína viral, originando la reacción de cruce que lleva a esta respuesta autoinmune.