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En trabajos previos demostramos que en ratones infectados con el MHV-A59 se expresan autoanticuerpos (autoAb) dirigidos contra la fumarilacetoacetatohidrolasa (FAH) presente en hígado y riñón. Los autoAb reconocen varias secuencias de la enzima, aunque sólo algunas de ellas poseen homología con diferentes proteínas del MHV. En este trabajo decidimos analizar en profundidad la reacción de cruce restringida a la región N-terminal de la FAH (secuencia 1-50). Con el propósito de localizar los epitopes reconocidos por los autoAb, en primer lugar se sintetizó por la técnica del PEPSCAN la secuencia 1-50 de la enzima como péptidos de 15 aminoácidos desplazados en un residuo. Los péptidos fueron enfrentados con sueros de ocho ratones infectados con el MHV y su reactividad medida por ELISA. Se halló que las secuencias 9-23 y 30-44 de la FAH reaccionaban significativamente (p<0.05 y p<0.01, respectivamente) con los autoAb. Los resultados permitieron delimitar los dos epitopes mínimos más relevantes dentro de cada región, los que correspondieron a las secuencias 9-15 (Asp-Ser-Asp-Phe-Pro-Ile-Glu) y la 36-42 (Ile-Gly-Asp-Glu-Ile-Leu-Asp), respectivamente. Se sabe que el reemplazo sistemático de cada aminoácido por Gly en una dada secuencia (análisis mutacional) permite identificar los residuos fundamentales para la unión de los Ab. Cuando se realizó este análisis con las secuencias 9-23 y 30-44 de la FAH se encontró que los residuos más importante en la secuencia 9-23 eran los correspondientes a las posiciones 9-12 (Asp-Ser-Asp-Phe) y la posición 36 (Ile) en la secuencia 30-44. La comparación de la posición de estos residuos en la FAH con respecto a las secuencias de varias proteínas del MHV demostró la ausencia de estricta coincidencia entre ellos. Estas observaciones indican que, si bien la similitud de secuencias entre las proteínas del MHV y la FAH juega un rol importante en la respuesta autoinmune, éste no sería el único mecanismo involucrado (en una presentación simultánea se analiza el papel de las DAMPs en la respuesta inducida por el MHV).

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