INVESTIGADORES
NERLI Bibiana Beatriz
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio de los factores involucrados en el equilibrio de reparto de proteínas en sistemas bifásicos acuosos de polietilenglicol-citrato de sodio
Autor/es:
PELLEGRINI, L.; BIBIANA BEATRIZ NERLI; PICÓ, G.
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; VII Congreso XXV Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2005
Institución organizadora:
Sociedad de Biología de Rosario
Resumen:
El coeficiente de reparto (Kr) de proteínas en sistemas bifásicos acuosos (SBAs) depende de las características estructurales tanto del PCF como de la proteína que se reparte. El objetivo del presente trabajo es analizar cómo influyen en el equilibrio de reparto de una proteína en SBAs no tradicionales formados por polietilenglicol (PEG) y citrato de sodio,  factores tales como el peso molecular del PCF, composición del sistema (longitud de la línea de unión), temperatura, pH e hidrofobicidad superficial de la proteína. Para ello se midieron los Krs de cuatro proteínas modelo: albúmina sérica bovina (BSA), tripsinógeno (TRPz), qimotripsinógeno (QTRPz) y lisozima (LISO). Se emplearon SBAs formados por PEGs de distintos pesos moleculares (1450, 3350, 8000), con composiciones correspondientes a distintas longitudes de línea de unión (TLL) y a dos pHs (5.20 y 8.20). Se estimó la hidrofobicidad superficial (So) de cada proteína mediante el empleo de 1-anilino 8- naftalen sulfonato de magnesio (ANS) como sonda óptica.  Se calcularon las variaciones de entalpía y entropía asociadas al equilibrio de reparto.             Se observó una tendencia de todas las proteínas a repartirse principalmente en la fase rica en sal, a excepción del QTRPz y LISO en los sistemas de PEG de menor peso molecular (1450). Los valores de Kr mostraron en todos los casos el siguiente orden TRPz<LISO@QTRPz. Para la BSA el equilibrio de reparto está totalmente desplazado hacia la fase rica en citrato para la mayoría de los sistemas ensayados. Tanto la disminución del peso molecular del PEG como el incremento de la TLL produjeron un incremento de Kr. Para las hidrofobicidades superficiales se observó la siguiente secuencia creciente: LISO, TRPz, QTRPz y BSA. El pasaje de las proteínas a la fase rica en sal mostró estar entrópicamente conducido.             La secuencia de los Krs observados muestra correlación con la hidrofobicidad superficial solamente para TRPz y QTRPz dado que ambas proteínas tienen puntos isoeléctricos y pesos moleculares similares. Para el caso de BSA predomina el efecto de exclusión por su gran tamaño, indepen-dientemente del pH. Para LISO a pH 8.20 predomina su unión preferencial al PEG debida a su bajo peso molecular y a pH 5.20 se desplaza el equilibrio hacia la fase rica en el citrato debido a su alta densidad de carga positiva El efecto de exclusión por tamaño también es evidenciado por el desplazamiento del equilibrio de reparto hacia la fase rica en sal ante un aumento del peso molecular del PEG.