Efecto de la Quimioterapia Fotodinámica Antimicrobiana sobre factores de virulencia de cepas de Candida causantes de candidiasis orofaríngea.

RAMADÁN, S. ; BULACIO, L. ; LUQUE, A. ; DALMASO, H. ; SORTINO, M.

Buenos Aires

Congreso; VIII Congreso de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínica.; 2018

Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínica.

La Quimioterapia Fotodinámica (QFDA), es una alternativa para el tratamiento de micosis, usa compuestos fotosensibilizantes y luz para inducir daño oxidativo en microorganismos. Posee ventajas frente a tratamientos convencionales como amplio espectro, baja tasa de generación de resistencia, mínimo daño a tejidos del hospedero y bajo costo. Previamente evaluamos la efectividad de la QFDA utilizando azul de toluidina O (ATO) frente a cepas de Candida aisladas de pacientes con candidiasis orofaríngea, observando efectividad frente a cepas sensibles y resistentes a antifúngicos comerciales. El objetivo de este trabajo fue evaluar su acción sobre factores de virulencia de estas cepas: capacidad inhibitoria frente a biofilms (BF) y el efecto sobre la producción de enzimas de secreción (EZ).La actividad antifúngica se evaluó con el método de microdilución en caldo (M27-A3-CLSI). La formación de BF se ensayó en microplacas; las levaduras se incubaron en RPMI y se lavaron con PBS para eliminar células planctónicas. Se coloreó la biopelícula formada con cristal violeta clasificándolas cepas en no formadoras, débilmente formadoras y buenas formadoras de BF de acuerdo a la densidad óptica de la solución proveniente de la coloración de la biopelícula. Se utilizaron 12 cepas de Candida: 3 Candida albicans; 6 Candida tropicalis y 3 Candida parapsilosis, todas buenas formadoras de BF. Se realizaron soluciones de ATO entre 0,24-1000 μg/mL, se colocaron en las microplacas con el BF formado y se irradiaron con luz blanca durante 1 hora, utilizando lámparas LEDs (Diodos Emisores de Luz). Para evaluar la viabilidad, se tomaron 10 μL de cada pocillo y se sembraron en agar Sabouraud. Se definió la Concentración Fungicida Mínima (CFM): mínima concentración de ATO con ausencia de viabilidad. Se consideró activo cuando se observaron CFMs