Utilización de extractos con actividad antifúngica fotosensibilizante de Thymophylla pentachaeta en el análisis de inhibición de factores de virulencia producidos por Candida albicans

CORDISCO ESTEFANÍA; SVETAZ LAURA; SORTINO MAXIMILIANO

Congreso; V Reunión Grupo Argentino de Fotobiología; 2020

Las candidiasis son las infecciones fúngicas más frecuentes en pacientes inmunocomprometidos y su tratamiento se dificulta debido al bajo número de antifúngicos disponibles y sus inconvenientes como toxicidad, generación de resistencia y alto costo. Una de las alternativas para el tratamiento es la terapia fotodinámica, que posee ventajas como amplio espectro de acción, baja probabilidad de generación de cepas fotorresistentes, mínimo daño a tejidos del hospedero y bajo costo. Esta estrategia utiliza moléculas fotosensibilizantes y luz de una determinada longitud de onda para inducir un daño oxidativo en microorganismos. En trabajos previos de nuestro grupo de investigación, se ha demostrado que los extractos hexánico y diclorometánico de raíces de Thymophylla pentachaeta variedad belenidium, irradiados con luz UV-A, poseen importante actividad antifúngica frente a Candida albicans, por lo que se plantea como objetivo de este trabajo utilizar los extractos de T. penchaeta activos para analizar la inhibición de los factores de virulencia producidos por dicho hongo. Se determinó la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) frente a C. albicans ATCC 10231 mediante el método de microdilución en caldo recomendado por el CLSI, realizándose en paralelo dos microplacas, una se irradió, previo a la incubación, durante 1 h, mientras que la otra, permaneció en oscuridad. Se obtuvo una CIM= 1,95 µg/mL para ambos extractos. Luego se analizó la inhibición de los factores de virulencia a la CIM, CIM/2 y CIM/4, con sus respectivos controles por triplicado. Se estudióformación de tubo germinativo: se incubó el inóculo tratado en suero bovino a 37ºC durante 2 h y se determinó la reducción porcentual de la formación de tubo germinativo;capacidad de adherencia: se incubó el inóculo tratado con una suspensión de células epiteliales y se determinó el número de levaduras adheridas;producción de enzimas proteolíticas: se sembraron 15 µl del inóculo tratado, en medios especiales suplementados con sangre, albúmina, yema de huevo y Tween 80 en cada caso, para evaluar el efecto sobre la producción de las enzimas hemolisinas, proteinasas, fosfolipasas y esterasas, respectivamente. Se observó que tanto el extracto hexánico como el diclométanico reducen notablemente la formación del tubo germinativo (entre un 85-87%) incluso hasta la CIM/4 (entre un 70-80%). Además hubo una disminución entre el 90% y 96% de la adherencia de las levaduras luego del tratamiento a la CIM, y entre un 50% y 60% a las CIM/2 y CIM/4. Se observó inhibición de esterasas y proteinasas a la CIM y CIM/2, no así de fosfolipasas. No se pudo determinar inhibición de hemolisinas porque la cepa de C. albicans utilizada no era productora. Estos datos proporcionan evidencia de extractos que podrían constituir una alternativa interesante para los tratamientos de candidiasis utilizando la terapia fotodinámica, reduciendo significativamente los inconvenientes para el hospedero.