Desarrollo de fitomedicinas antifungicas a partir de plantas de la fora argentina

GARRIDO, MARÍA CLARA; CORDISCO, ESTEFANÍA; SORTINO, MAXIMILIANO; SVETAZ, LAURA

Rosario

Congreso; XXI Congreso y XXXIX Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2019

Sociedad de Biología de Rosario

Las micosis son muy frecuentes en pacientes inmunocomprometidos y su tratamiento se dificulta debido a la alta toxicidad y eficacia limitada de las drogas antifúngicasactualmente en uso. Por ello, existe una creciente necesidad de generar alternativas para el tratamiento de infecciones fúngicas como lo son la Terapia en combinación (TC) y la Terapia fotodinámica (TFD). La TC se fundamenta en que mezclas que actúen sinérgicamente ejercerán el mismo efecto con menores dosis de cada componente. La TFD se basa en la utilización de moléculas fotosensibilizantes que al ser irradiadas con luz inducen un daño oxidativo en patógenos microbianos. Ambas terapias tienen como ventajas sobre los tratamientos convencionales la reducción de los efectos tóxicos y la baja probabilidad de generación de resistencia. Se evaluóla actividad antifúngica en solitario, en combinación y fotodinámica de 47 extractos obtenidos a partir de 11 especies de la flora Argentina, con el objetivo de diseñar una combinación de extractos tendientes a obtener una fitomedicina antifúngica. Se utilizó el método de microdilución en caldo para determinar la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) yConcentración Fungicida Mínima (CFM) en solitariofrente a Candida albicans. Se consideraron activos los extractos con CIM < 1000µg/mL y fungicidas aquellos con CFM < 1000µg/mL. Se encontraron tres extractos activos: extractos acetato de etilo de Larrea divaricata (CIM/CFM = 250/500 µg/mL) y Zuccagnia punctata (CIM/CFM = 31,25/62,5 µg/mL) y extracto diclorometánico de Phytolacca tetramera (CIM/CFM = 250/500 µg/mL). Laactividad en combinación se evaluó utilizando la técnica del Tablero de Ajedrez, que permite determinar el tipo de interacción a través del Índice de Concentración Inhibitoria Fraccionaria (ICIF= ): ICIF≤1: sinergismo; ICIF=1: indiferencia o aditivismo e ICIF>1: antagonismo. Se analizaron los tipos de interacción entre pares de los tres extractos activos y se encontró interacción sinérgica (ICIF=0,5) en la combinación de los extractos de L.divaricata y Z.punctata (CIM=125/15,6 µg/mL), siendo la misma fungistática. La actividad fotosensibilizante,se evaluó empleandouna modificación del método de microdilución en caldo consistente en irradiarcon luz UVA, previo a la incubación. El extracto diclorometánico de Porophyllum lanceolatum demostró actividad antifúngica fotosensibilizante (CIMLuz= 15,6µg/mL / CIMOscuridad>1000 µg/mL). Posteriormente, se evaluó la actividad en combinación deL. divaricata y Z. punctata con el extracto de P. lanceolatum obteniéndose una combinación fungicida (CFM=125/15,6/3,9 µg/mL). Finalmente, la mezcla de tres extractos (Ld/Zp/Pl) se ensayó contra otras especies de Candida; C.tropicalis (CIM=250/31,2/7,8 µg/mL; CFM=250/31,2/7,8 µg/mL), C. glabrata (CIM=500/62,5/15,6 µg/mL; CFM= 1000/125/31,2 µg/mL) y C. krusei (CIM=250/31,2/7,8 µg/mL; CFM= µg/mL). El tratamiento antifúngico con la mezcla obtenida,que contiene menores concentraciones de los tres componentes,permitiría reducir tanto la generación de resistencia comoel riesgo de toxicidad en el huésped.