Efecto sobre viabilidad y factores de virulencia en cepas de Candida causantes de candidiasis orofaríngea.

RAMADÁN, S.; LUQUE, A.; DALMASO, H.; SORTINO, M. ; BULACIO, L.

Rosario

Congreso; XX Congreso y XXXVIII Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario.; 2018

Sociedad de Biología de Rosario

La terapia antifúngica fotosensitiva, que usa compuestos fotosensibilizantes y luz para inducir daño oxidativo en microorganismos, es una alternativa para el tratamiento de micosis. Presenta ventajas frente a tratamientos convencionales como amplio espectro, baja tasa de generación de resistencia, mínimo daño a tejidos del hospedero y bajo costo. El objetivo de este trabajo fue evaluar su acción sobre viabilidad y sobre factores de virulencia de estas cepas: se analizaron capacidad inhibitoria frente a biopelícula y el efecto sobre la producción de enzimas de secreción (EZ). La actividad antifúngica se evaluó con el método de microdilución en caldo (M27-A3-CLSI). La formación de biopelícula se ensayó en microplacas; las levaduras se incubaron en RPMI y se lavaron con PBS para eliminar células planctónicas. Se coloreó la biopelícula formada con cristal violeta clasificándolas cepas en no formadoras, débilmente formadoras y buenas formadoras de BF de acuerdo a la densidad óptica de la solución proveniente de la coloración de la biopelícula. Se utilizaron 20 cepas de Candida: 6 Candida albicans; 10 Candida tropicalis y 4 Candida parapsilosis, todas buenas formadoras de biopelícula. Se realizaron soluciones de azul de ortotoluidina entre 0,24-1000 µg/mL, se colocaron en las microplacas con células planctónicas y biopelículas formadas, y se irradiaron con luz blanca durante 1 hora, utilizando lámparas LEDs (Diodos Emisores de Luz). Para evaluar la viabilidad, se tomaron 10 µL de cada pocillo y se sembraron en agar Sabouraud. Se definió la Concentración Fungicida Mínima (CFM): mínima concentración de azul de ortotoluidina con ausencia de viabilidad. Se consideró activo cuando se observaron CFMs