Metabolitos de Porophyllum obscurum con potencial aplicación en Quimioterapia Fotodinámica Antimicrobiana

POSTIGO, AGUSTINA; ALVAREZ, SANDRA; ZACCHINO, SUSANA; SORTINO, MAXIMILIANO

Río Gallegos

Congreso; IV Congreso Iberoamericano de Productos Naturales en Patagonia: La Diversidad Química y Biológica; 2014

UNPA

Algunas plantas producen, como protección frente a patógenos y predadores, moléculas fotosensibilizantes (FS) que, al ser excitadas por luz de una determinada longitud de onda, ejercen efectos tóxicos sobre biomoléculas y células, destruyéndolas. La Quimioterapia Fotodinámica Antimicrobiana (QTFA) es una opción terapéutica recientemente desarrollada que utiliza moléculas FS y luz de una determinada longitud de onda para inducir un daño oxidativo en patógenos microbianos. La QTFA es un campo emergente de investigación que posee muchas ventajas frente a los tratamientos antifúngicos tradicionales, tales como amplio espectro de acción, baja probabilidad de generación de cepas fotorresistentes, mínimo daño a tejidos sanos del hospedero, compatibilidad con terapias antifúngicas convencionales, etc. El objetivo del presente trabajo fue detectar y aislar compuestos FS de Porophyllum obscurum (Spreng) DC y evaluar su fotoactividad frente a un panel de cepas clínicas de Candida spp. (C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis y C. krusei) aisladas de pacientes con candidiasis orofaríngeas. P. obscurum es un sub-arbusto aromático nativo de América, perteneciente a la familia Asteraceae. En Argentina, habita el centro y norte del país y es conocido como Yerba del venado. Sus partes aéreas secas y molidas se extrajeron por maceración con hexano, diclorometano, acetato de etilo y metanol, obteniéndose los respectivos extractos. Estos extractos se evaluaron por el método de microdilución en caldo de CLSI, modificado para detectar fotoactividad antifúngica. El ensayo se realizó por duplicado en dos microplacas. Después de agregar el inóculo del hongo, una de ellas se irradió con luz UV de 350 nm y la otra, no. Luego, ambas se incubaron 24 h en oscuridad a 28ºC. Los extractos hexánico y diclorometánico demostraron actividad FS, con Concentraciones Inhibitorias Mínimas (CIMs) de 3,91 y 7,81 µg/mL, respectivamente, luego de la irradiación mientras que fueron inactivos (CIM > 1000 µg/mL) en oscuridad. El extracto hexánico fue sometido a cromatografía en columna aislándose 2,2´:5´,2"-tertiofeno (1). El compuesto 1 fue evaluado frente el panel de Candida spp. optimizándose el tiempo de irradiación y la distancia a la fuente de luz con el programa Design Expert. La condición óptima obtenida fue 5 min y 6 cm con un factor de Desirabilidad de 0.989. Se realizó además un ensayo de tiempo de muerte y un ensayo de viabilidad utilizando microscopía confocal, con lo cual se comprobó que el compuesto 1 bajo las condiciones óptimas de irradiación producen la reducción completa de células viables en 5 min. Estos resultados proveen evidencia de que el compuesto 1 constituiría una alternativa de QTFA para el tratamiento de candidiasis orofaríngeas