Efecto de un hidrocarburo aromático policíclico modelo (β-naftoflavona) sobre la actividad enzimática EROD en Cnesterodon decemmaculatus

RABUFFETTI, G.; SOMOZA G.M.; CARRIQUIRIBORDE, P.

Mar del Plata

Congreso; VIII Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental SETAC, Capítulo Argentino; 2022

SETAC (Society of Environmental Toxicology and Chemistry)

Los hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAH) son una fuente importante de contaminación acuática, siendo β-naftoflavona (BNF) un PAH modelo. La isoforma del citocromo P450, cyp1a1, es inducida específicamente a través del receptor arilo por los PAH y por tanto su actividad enzimática, etoxiresorufina-o-desetilasa (EROD), ha sido históricamente utilizada como biomarcador de exposición a dichos contaminantes. Cnesterodon decemmaculatus es un pez de nativo de Argentina que habita ambientes dulceacuícolas susceptibles de contaminación por PAH. El objetivo de este trabajo fue estudiar la cinética de respuesta y la relación dosis respuesta sobre la actividad enzimática EROD en C. decemmaculatus expuesto a β-naftoflavona. Para obtener la curva tiempo respuesta se realizó un bioensayo en condiciones de laboratorio exponiendo por quintuplicado a los peces a una concentración de 100 µg/L de BNF por 24, 48, 72 y 96 h (fase exposición) y luego 72 h en agua libre de BNF (fase depuración), manteniendo siempre un grupo control. Para obtener la curva dosis respuesta, se expuso por quintuplicado durante 48 y 96 h a los peces a concentraciones de BNF de 0,1, 1, 10 y 100 µg/L, y un grupo control. En ambos casos, se utilizaron ejemplares juveniles con un peso de entre 0,02 y 0,05 gr que fueron homogenizados individualmente. EROD se midió por fluorometría y las proteínas totales por espectrofotometría. La curva tiempo respuesta mostró que a las 24 h de exposición, los peces expuestos presentaron un incremento significativo de la actividad EROD (1324%) respecto a los controles. Estos valores se mantuvieron a lo largo de toda la experiencia, descendiendo sólo levemente luego de las 72 de exposición y manteniéndose un 691% sobre el control hasta las 72 h de depuración. La curva dosis respuesta mostró a las 48 h de exposición un aumento significativo () de la actividad EROD a partir de 10 µg/L, incrementándose aún más (727%) a 100 µg/L. A las 96 h se mantuvo prácticamente la misma diferencia confirmando el plateau alcanzado en el ensayo de cinética. En ambos ensayos, el contenido de proteínas no varió significativamente entre tratamientos respecto al control. Se puede concluir que a partir de las 24h la enzima es inducida y que luego de 48 h se alcanzan los máximos niveles de actividad y que tales niveles se mantienen al menos por 72 h post exposición. El NOEC y LOEC obtenidos a 48 y 96 h de exposición fueron iguales, con valores de 1 y 10 µg/L.