FUNCIONALIDAD DEL LOCUS agr EN MUTANTES DE S. aureus RESISTENTES A TIGECICLINA

HERRERA MELINA; POSSE GRACIELA; MOLLERACH MARTA; DI CONZA JOSÉ

Ciudad Autonoma de Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología; 2013

Asociación Argentina de Microbiología

Introducción: el locus agr (gen regulador accesorio) es un regulador transcripcional que controla la expresión de genes codificantes de proteínas asociadas a virulencia en Staphylococcus aureus. En base al Polimorfismo en dicho locus se definen cuatro grupos diferentes. La pérdida de la funcionalidad de agr ha sido asociada con el desarrollo de disminución de la sensibilidad a vancomicina, afectando el tratamiento de las infecciones causadas por este microorganismo. Objetivos: determinar la funcionalidad del locus agr en cepas de S. aureus resistentes a tigeciclina seleccionadas in vitro, y evaluar su relación con el cambio de sensibilidad a vancomicina. Materiales y Métodos: Se estudiaron 12 aislamientos de S. aureus (5 SARM y 7 SASM) y sus respectivas cepas mutantes resistentes a tigeciclina seleccionadas in vitro. La relación clonal entre las mutantes y sus respectivas parentales se corroboró por PFGE. La sensibilidad a distintos antimicrobianos se determinó por método de dilución en agar. En las cepas de SARM se determinó el tipo de casete SCCmec presente mediante PCR,. El grupo agr se determinó en todas las cepas por multiplex PCR, mientras que su la funcionalidad se evaluó por la expresión de delta-hemolisina en agar sangre de carnero. Se utilizó para esto la cepa S. aureus RN 4220, la cual produce sólo beta-hemolisina actuando sinérgicamente frente a la delta-hemolisina de la cepa evaluada produciendo así una zona de mayor hemólisis. Resultados: Las cepas parentales y mutantes resistentes a tigeciclina fueron isogénicas. La caracterización del grupo agr dio como resultado 7/12 cepas pertenecientes al grupo I, 4/12 al grupo II y una al grupo III. Al evaluar la funcionalidad del locus agr, se observó que 10/12 cepas parentales expresaron la delta-hemolisina, 9/10 mutantes también la expresaron y solo una de estas cepas perdió la expresión con respecto a su respectiva cepa parental. En ésta cepa además de la disminución en la sensibilidad a tigeciclina se evidenció un cambio en la CIM a vancomicina, la cual aumentó 4 veces, adquiriendo el fenotipo de una cepa VISA. En particular, esta cepa mostró un casete SCCmec IV y pertenece al grupo agr II.