DETECCIÓN DE qepA, qnrB10 y aac(6´)-Ib-cr EN UN AISLAMIENTO DE Escherichia coli RESISTENTE A QUINOLONAS

RINCÓN GIOVANNA; RADICE MARCELA; GIOVANAKIS MARTA; GUTKIND GABRIEL; DI CONZA JOSÉ

Buenos Aires

Congreso; VII Congreso de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas. SADEBAC; 2012

AAM

Existen diversos mecanismos de resistencia a quinolonas mediados por plásmidos, los cuales confieren bajos niveles de resistencia pero que ayudan a seleccionar y complementar otros mecanismos conllevando a generar altos niveles de resistencia, dentro de ellos se describen los genes qnr, aac(6´)Ib-cr, oqxAB y qepA, En este trabajo se caracterizó un aislamiento clínico de E. coli que presentaba altos niveles de resistencia a quinolonas. Materiales y Métodos: El aislamiento de E. coli B2 fue recuperado la primera semana de octubre de 2010, en el Hospital Británico de la Ciudad Autónoma de Buenos Aires. La cepa de E. coli J53 resistente a azida fue utilizada para realizar ensayos de conjugación. Las transconjugantes se seleccionaron en agar suplementado con azida (200µg/ml) y ácido nalidíxico (2,5µg/ml) o azida (200µg/ml) y ciprofloxacina (0,25µg/ml). E coli J53 y sus transconjugantes fueron analizadas por estudios de REP y ERIC-PCR. Se determinó la sensibilidad por dilución en agar a: ácido nalidíxico (NAL), ciprofloxacina (CIP), tobramicina (TOB), gentamicina (GEN), levofloxacina (LEV) y gatifloxacina (GAT) y por difusión en disco a NAL, CIP, GEN, estreptomicina (STR) y amikacina (AKN) según CLSI. La detección genotípica de qnrA, qnrB, qnrS, qnrC, qnrD, aac(6´)Ib y qepA se realizó por reacción en cadena de la polimerasa. La determinación de aac(6´)Ib-cr se realizó mediante la digestión con BseGI y se confirmaron por secuenciación. Resultados: E. coli B2 presentó resistencia a CIP, NAL, TET y AKN y sensibilidad a GEN y STR, siendo la CIM a NAL >512 μg/ml, a CIP, LEV y GAT >64 μg/ml, TOB = 64 μg/ml y GEN = 2 μg/ml. Se amplificaron y secuenciaron los genes qepA, qnrB10 y aac(6´)Ib-cr. Se obtuvieron transconjugantes (E. coli J53-B2) en agar suplementado con azida y ácido nalidíxico. Mediante REP y ERIC-PCR los transconjugantes seleccionados mostraron el mismo perfil de bandas que la cepa receptora (E. coli J53). E. coli J53-B2 fue positiva para los genes qnrB y aac(6´)Ib-cr pero negativa para qepA. E. coli J53-B2 presentó menor nivel de resistencia a NAL (CIM= 4 µg/ml), a CIP (CIM =1 µg/ml) y a TOB (CIM = 8µg/ml). No se observó diferencia en los niveles de sensibilidad a GEN, LEV y GAT en E. coli J53-B2 respecto a la cepa receptora E. coli J53. Conclusiones: Este trabajo constituye la primera descripción en la Argentina del gen qepA, que junto a la presencia de qnrB10 y aac6´-Ib-cr, explican en parte los altos niveles de la resistencia de esta cepa a quinolonas y derivados. Si bien todos los mecanismos estudiados han sido descriptos como de localización plásmidica, qepA no ha sido transferido o seleccionado en los ensayos de conjugación realizados. Se hace necesario lleva a cabo vigilancia de los mecanismos de resistencia a quinolonas, ya que están emergiendo en nuestro país aquellos que ya han sido descritos en otras partes del mundo.