Diseminación de marcadores de resistencia a cefalosporinas de tercera generación, carbapenemes y colistina en un efluente de aguas residuales de la provincia de Buenos Aires, Argentina.

GHIGLIONE BÁRBARA; NUÑEZ L; FIGUEROA ESPINOSA ROQUE A; TORNELLO C; MANTOVANO J; BRUNETTI FLORENCIA; BISPO DA SILVA JS; PEPE RAZZOLINI MT; D´AMICO GONZÁLEZ, G; DI CONZA JOSÉ; GUTKIND GABRIEL; POWER PABLO; DROPA MILENA

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología - CAM 2019; 2019

La presencia de microorganismos resistentes a los antimicrobianos en el ambiente es una preocupación emergente con serias implicancias en Salud Pública. El objetivo de este estudio fue evaluar la propagación de genes de resistencia, elementos genéticos móviles y la diversidad de los microorganismos productores de β-lactamasa (Bla) en un efluente de aguas residuales. Se recolectaron 1000 ml de agua ?pre-tratamiento? de una planta de procesamiento de efluentes residuales de la provincia de Buenos Aires, Argentina. Se determinó el porcentaje de bacilos gram negativos resistentes a antibióticos β-lactámicos por el método de dilución en agar en el medio violeta rojo bilis lactosa agar (VRBLA), con y sin antibiótico (ceftriaxona, ceftazidima, imipenem, meropenem y colistina). La muestra fue además filtrada con filtros de celulosa (poros de 0,45 µm). El ADN se extrajo directamente de una de las membranas utilizando un kit comercial y se utilizó para la búsqueda por PCR de grupos de incompatibilidad de plásmidos según Carattoli et al. (Inc); integrasas de clase 1, 2 y 3 (intI); transposasas ISCR1, IS26, IS10 y ISEcp1; genes codificantes de β-lactamasas (bla) CTX-M, IMP, VIM, SPM-1, NDM, PER-2, GES, CMY, KPC y OXA-48; y genes codificantes de fosfoetanolamina-transferasa MCR-1, -2 y -3. La membrana restante se cultivó en agar McConkey. Se determinó la sensibilidad a los antibióticos utilizando la técnica por difusión en disco (CLSI). La identificación bacteriana se realizó por MALDI-TOF/MS. Los microorganismos sospechosos de producir Bla fueron evaluados por PCR. Se observó una prevalencia del 4,5% de bacterias resistentes a cefalosporinas de tercera generación. Los genes detectados en el ADN extraído de la membrana incluyeron al grupo de incompatibilidad plasmídico IncF, integrasas intI1 e intI3 y las 4 transposasas evaluadas, los genes blaCTX-M, blaOXA-48, blaVIM, blaNDM, blaPER-2, blaGES, blaCMY y blaKPC; y mcr-1 y mcr-3. Se identificaron aislamientos de K. pneumoniae, K. variicola y E. cloacae Complex productores de KPC-2. La detección del gen pilv-I en K. pneumoniae fue negativa. Los dos únicos aislamientos recuperados de E. coli poseían blaCTX-M-2 asociada a integrón complejo de clase 1, y un aislamiento de K. pneumoniae poseía blaCTX-M-15 y blaKPC-2; las metalo-β-lactamasas blaIMP y blaVIM se detectaron como gen en casete de un integrón de clase 1 en aislamientos de K. oxytoca y P. aeruginosa.La aparición de genes de resistencia a antimicrobianos de última elección, así como elementos genéticos móviles, en ADN metagenómico y patógenos potencialmente relevantes de MDR en una muestra de aguas residuales sin tratar puede contribuir a la propagación de la resistencia bacteriana. Nuestros resultados resaltan la necesidad de centrarse en el concepto de ?Una Salud?, con el objeto de establecer políticas efectivas para reducir este creciente problema de Salud Pública.