Análisis prospectivo de marcadores de Resistencia en Pseudomonas aeruginosa: Relevamiento multicéntrico de genes de Resistencia a carbapenemes y fluorquinolonas.

ELENA ALAN; CEJAS DANIELA; GUTKIND GABRIEL; DI CONZA JOSÉ; RADICE MARCELA

Buenos Aires

Congreso; VIII Congreso SADEBAC; 2018

AAM

La versatilidad genética de P. aeruginosa facilita la adquisición de diversos genes de resistencia que dificultan aún más su tratamiento, siendo especialmente relevantes aquellos que confieren resistencia a los carbapenemes. En nuestro país, la resistencia enzimática a carbapenemes en P. aeruginosa se asocia a la incorporación de genes codificantes para metalo-β-lactamasas (MBL) (65%) y enzimas tipo KPC (35%).Por su parte, las mutaciones en las topoisomerasas son el mecanismo más frecuentemente involucrado en la pérdida de la sensibilidad a fluoroquinolonas, sin embargo, resulta de interés el estudio de los marcadores plasmídicos de resistencia (PMQR) ya que, si bien por si mismos solo conllevan a valores de sensibilidad disminuida a las quinolonas, estos genes son transferibles horizontalmente y representan un paso previo a la selección de mutantes resistentes.En este trabajo se buscó relevar los perfiles de resistencia en P. aeruginosa provenientes de 13 centros de salud del país, recuperados en el marco de un estudio prospectivo (período del 14 al 20 de noviembre de 2016). Se consideró de especial interés la detección de PMQR y de carbapenemasas adquiridas.Se recolectaron un total de 32 aislamientos de P. aeruginosa. Los perfiles de sensibilidad a β-lactámicos, quinolonas, aminoglucósidos, glucopéptidos y polimixinas fueron obtenidos mediante métodos automatizados. Se realizó un screening fenotípico para la búsqueda de MBL y KPC por difusión en medio sólido utilizando discos de imipenem, EDTA (1 μM), meropenem y aztreonam. Se investigó la presencia de genes codificantes de MBLs o KPC (según Ellington 2007 y Bradford 2004). El entorno genético se analizó por mapeo por PCR. Se investigó la presencia de PMQR mediante PCR (según Arias 2010, Kim 2009, Rincón 2013, Shao 2011 y Hoban 2011). Para la confirmación de aac-(6?)-Ib-cr se realizó un ensayo de PCR-RFLP digiriendo con con BseGI. Todos los amplicones obtenidos fueron secuenciados mediante Sanger.Nueve/32 aislamientos resultaron resistentes a carbapenemes, sólo 1 fue productor de MBLs la cual correspondió a VIM-2, cuyo gen codificante se encontró como parte de un integrón de clase I. 9/32 aislamientos fueron no sensibles a quinolonas. En un aislamiento se detectó la presencia de qnrB1, mientras que en el aislamiento portador de blaVIM-2 se detectó también aac-(6?)-Ib-cr.Los valores de resistencia a carbapenemes y quinolonas observados en este estudio correlacionan con los reportados para P. aeruginosa en los últimos años, en nuestro país. La participación minoritaria de las MBLs en la resistencia a carbapenemes y la MBL detectada resultan concordantes con lo reportado. La presencia de PMQR en esta especie es, sin embargo, poco común. Mas infrecuente aún es la presencia conjunta de MBL y PMQR. Si bien estos últimos no otorgan resistencia franca a las quinolonas, facilitan la selección de mutantes resistentes, dificultando aún más la terapia antibiótica.