INVESTIGADORES
DI CONZA Jose Alejandro
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto del regulador transcripcional AmpR en la producción de biofilms y en la virulencia de Stenotrophomonas maltophilia.
Autor/es:
ALCARAZ ELIANA; GARCÍA CARLOS; OJEDA ZACHARA E; QUIÑONES P; FRIEDMAN L; DI CONZA JOSÉ; PASSERINI DE ROSSI BEATRIZ
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología -; 2016
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Microbiología
Resumen:
Las infecciones causadas por biofilms de patógenos multirresistentes como Stenotrophomonas maltophilia (Sm) constituyen un problema de salud emergente. Los biofilms, microorganismos que crecen sobre una superficie dentro de una matriz de sustancias poliméricas extracelulares (EPS), son un importante factor de virulencia. En las enterobacterias el regulador transcripcional AmpR regula la expresión de ampC, mientras que en Pseudomonas aeruginosa regula además la formación de biofilms. Estudios en Sm K279a y K279a ampRFS (deleción de 121 pb en ampR) demostraron que la inducción de las β-lactamasas L1 y L2 depende de AmpR. Nuestro objetivo fue estudiar la función de AmpR en la producción de biofilms y EPS y en la virulencia de Sm. Las cepas K279a, K279a ampRFS y K279aM11 (mutación espontánea en ampR responsable de su expresión constitutiva), cedidas por el Dr. Avison (University of Bristol, UK), se cultivaron en TSB a 35ºC durante 48h. Se evaluó la formación de biofilms en tubos, microplacas y cubreobjetos. Se cuantificó espectrofotométricamente la biomasa por tinción con cristal violeta y las EPS mediante tinción con calcofluor. La arquitectura de los biofilms se evaluó mediante microscopía confocal (CSLM). Se determinó el peso seco de EPS, se cuantificaron proteínas y carbohidratos, y se analizaron los espectros de reflexión total atenuada infrarroja con transformada de Fourier (ATR-FTIR) de los mismos. La virulencia se evaluó en larvas de Galleria mellonella. El análisis estadístico se basó en el test ANOVA seguido de Bonferroni. La evaluación de biofilms en tubos evidenció una fuerte adhesión de K279a ampRFS que formó un anillo de mayor espesor que los de K279a y K279aM11. La biomasa de K279aM11 fue significativamente menor (P