Analisis de los mecanismos enzimaticos implicados en la resistencia a inhibidores de b-lactamasas en Escherichia coli.

ZEBALLOS ALFREDO; MENDEZ EMILCE; AYALA JUAN; DI CONZA JOSE

Cordoba, Argentina

Congreso; XI Congreso Argentino de Microbiologia.; 2007

AAM

La emergencia de E. coli resistentes a la combinacion de b-lactamicos de amplio espectro con inhibidores de b-lactamasas generalmente se ha atribuido, en nuestro pais, a la hiperproduccion de la b-lactamasa TEM-1. Sin embargo, en otras regiones del mundo se han descripto otros mecanismos enzimaticos que participarian en dicha resistencia, como por ejemplo la presencia de oxacilinasas, cefalosporinasas o  b-lactamasas TEM resistentes a inhibidores (IRT). El objetivo del presente trabajo es conocer en detalle los mecanismos que median dicha resistencia en aislamientos de E. coli en nuestra region, con la finalidad de elaborar estrategias tendientes a disminuir la aparicion de nuevas cepas con este perfil de resistencia. Se estudiaron aislamientos clinicos de E. coli de diversos origenes. Para esto se seleccionaron aquellos microorganismos sensibles a cefoxitina, que presentaron resistencia in vitro a amoxicilina y a su combinacion con acido clavulanico. Tales perfiles fueron corroborados mediante pruebas de difusion por discos y determinando la Concentracion Inhibitoria Minima. Por otra parte, se realizo tambien la  caracterizacion genetica de los microorganismos, con la finalidad de dilucidar los mecanismos que mediaban su resistencia, a traves de PCR, empleando oligonucleotidos especificos para diversos grupos de genes (blaTEM, blaOXA-2 y blaOXA-10). Los productos de amplificacion blaTEM fueron secuenciados y posteriormente procesados mediante herramientas bioinformaticas. Finalmente, los resultados obtenidos fueron comparados con secuencias depositadas en bases de datos. De los 9 aislamientos estudiados, todos amplificaron para el grupo blaTEM. Las secuencias de 7 amplicones (fragmento interno de 768 bp) mostraron un 100% de identidad  con blaTEM-1. El resto de las secuencias presentaron menor porcentaje de identidad. Tres de los aislamientos blaTEM-1-like amplificaron para genes del tipo blaOXA-2 y ninguno para el grupo blaOXA-10-like. Estos resultados sugieren la presencia de distintos mecanismos involucrados en la resistencia a inhibidores de b-lactamasas en las bacterias estudiadas. La mayoria de las mismas codificarian para b-lactamasas tipo TEM-1, lo cual haria suponer una hiperproduccion de la mencionada enzima. En otros aislamientos, los datos de secuencia permiten sospechar la presencia de b-lactamasas de tipo IRT.  Ademas, cabe destacar que la expresion de los genes blaOXA-2-like,  contribuiria en gran medida a la emergencia de la resistencia observada en esta especie bacteriana puesto que estas oxacilinasas son poco inhibidas por acido clavulanico.