Efecto de los antibacterianos sobre la formación de biopelícula en un aislamiento clínico de Inquilinus limosus.

PINO MARYLÚ; BARONI MARÍA ROSA; MENEGHETTI FERNANDO; GUTKIND GABRIEL; DI CONZA JOSÉ

Ciudad Autonoma de Buenos Aires

Congreso; 157 Jornada Cientifica "Resistencia bacteriana y uso racional de los antibióticos"; 2013

Asociación Argentina de Microbiología

Antecedentes: La infección y colonización por Inquilinus limosus ha sido recientemente reportada en pacientes con fibrosis quística (PFQ). Pocos son los aislamientos de esta especie comunicados en el mundo y la mayoría de ellos aislados de PFQ. El significado de su aislamiento es aún incierto, pero el patrón de resistencia múltiple a antimicrobianos en I. limosus, junto al fenotipo mucoide y su capacidad para formar biopelículas (BP) podrían explicar la capacidad de persistir en las vías respiratorias de los PFQ. El objetivo de este trabajo fue comparar los efectos in vitro de distintas familias de antibacterianos sobre la formación de BP de un aislamiento clínico de I. limosus. Metodología: Inquilinus limosus MP06 fue aislado a partir de una muestra de esputo de un PFQ, en Santa Fe, Argentina, en el año 2006. La determinación de la CIM sobre el cultivo planctónico se realizó por el método de microdilución en caldo siguiendo lineamientos generales del CLSI. Las BP se formaron en microplacas fondo plano, incubados durante 72 horas a 35 °C en ausencia de antimicrobiano (ATM) y en presencia de concentraciones subinhibitorias de ATM (1/2 CIM). Se ensayaron los siguientes ATM: colistina (COL), tobramicina (TOB), imipenem (IMI), azitromicina (AZI) y ciprofloxacina (CIP). La BP formada fue teñida con cristal violeta (CV) y la biomasa (BM) se cuantificó midiendo la densidad óptica (DO) a 540 nm luego de la elución del CV retenido con etanol 95%. El ensayo, realizado con dodecuplicados, se analizó mediante el test de Student y se aplicó la corrección de Welch cuando corresponda. Los antimicrobianos que duplicaron la DOmedia respecto de la BP formada en ausencia del mismo, se consideraron como ?fuertes estimuladores? de la formación de la BP. La sensibilidad de la BP se evaluó mediante la concentración mínima inhibitoria de la BP (CIM-b) y la viabilidad de la BP se evaluó posteriormente determinando la concentración mínima de re-crecimiento (CMR). Resultados: La BM de la BP formada en presencia de COL, TOB y CIP fue significativamente mayor (P1024, 0,25, 2 y 1, de CIM-b (μg/ml): 1,128, 4, 2048, 512, 128, 64 y 1, respectivamente. Conclusiones: Los elevados valores de CIM y CMR para COL y TOB, sumado a la capacidad para aumentar la producción de BP en concentraciones subinhibitorias de estos ATM, alertan sobre su administración. Por el contrario, los valores in vitro obtenidos para IMI, AZI y CIP, sugieren que podrían ser candidatos para estudios complementarios como la evaluación del efecto sinérgico entre estos antimicrobianos. Es necesario efectuar el análisis de estos parámetros en varios aislamientos de I. limosus para confirmar el comportamiento observado.