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Objetivo Los integrones son estructuras implicadas en la adquisición de determinantes que confieren resistencia a antibióticos. Su permanente diseminación representa un problema creciente de salud pública debido a que genera complicaciones a la hora de aplicar una terapia antimicrobiana efectiva, en especial cuando están involucradas bacterias multirresistentes. La presencia de integrones de clase 1 ha sido ampliamente descripta en bacterias gram negativas; sin embargo, no existen suficientes relevamientos en nuestro país referidos a bacterias gram positivas. Hasta el momento algunas de las especies descriptas a partir de aislamientos clínicos en China y Colombia, han sido S. aureus, S. epidermidis, E. faecalis y E. faecium. Debido a que los integrones de clase 1 son los más frecuentemente hallados a partir de aislamientos clínicos, el objetivo del siguiente estudio consiste en detectar la presencia de integrones de clase 1 en aislamientos de Enterococcus spp. y S. aureus provenientes tanto de la comunidad como de hospitales de la Argentina. Materiales y Métodos En el presente trabajo se analizaron 163 cepas de los géneros Enterococcus y Staphylococcus, recuperadas durante el período 2004-2011, en las provincias de Bs. As., Santa Fe y Misiones. Los aislamientos de enterococos, incluyeron cepas de E. faecium (16), E. raffinosus (4) y E. faecalis (20), siendo 28 de las 40 cepas resistentes a vancomicina. Dentro de los aislamientos de estafilococos, todos ellos de la especie S. aureus, 55 correspondían a portadores, 58 se recuperaron a partir de infecciones asociadas a la comunidad y 10 a partir de infecciones intrahospitalarias. En el 97,6% de las cepas de S. aureus había sido detectado el gen mecA, el cual se encontró asociado en 109 de los 120 aislamientos meticilino-resistentes al casete SCCmec de tipo IV. El ADN extraído a partir de las cepas previamente descriptas se sembró en una membrana de nylon y se analizó con sonda de ADN para integrasa de clase 1 (intI1) (según las recomendaciones del fabricante), a partir de un fragmento previamente purificado, secuenciado y marcado con fosfatasa alcalina del kit Amersham Gene Images AlkPhos Direct Labelling and Detection System. Además de los ADN muestra se incluyeron controles negativos y positivos para int 1; los controles negativos consistieron en ADN extraído a partir de cepas de M. morganii PP07 y E. coli XL1Blue, mientras que los controles positivos fueron extraídos a partir de cepas de Salmonella Infantis S21, C. freundii 14 y K. pneumoniae 22K portadoras de plásmidos de resistencia. Para comprobar la presencia de ADN en todas las membranas, las mismas se deshibridaron y rehibridaron con sonda de ADN 16S. Resultados El 100% las cepas de cocos gram positivos analizadas resultaron negativas para la presencia del gen de integrasa clase 1. En todos los controles positivos se detectó la señal quimioluminiscente, la cual estuvo ausente en los controles negativos, al hibridar con sonda int 1. Además dieron positivas todas las muestras analizadas con sonda de ADN 16S. Ambos controles indicaron el correcto funcionamiento de la técnica de hibridación con sonda. Conclusión Las 163 cepas de Enterococcus spp. y S. aureus analizadas no portan la integrasa de clase 1 en su ADN lo cual nos indica la baja diseminación de dicha plataforma de reclutamiento en bacterias gram positivas en nuestro país. Será necesario continuar analizando un mayor número de aislamientos para detectar de manera temprana la aparición de integrones de resistencia en gram positivos, incluyendo la búsqueda de integrones de clase 2 y 3, a fin de poder analizar las resistencias asociadas e implementar esquemas de tratamiento adecuados para prevenir o disminuir su diseminación a futuro.

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