RESISTENCIA A QUINOLONAS MEDIADA POR PLASMIDOS EN Enterobacteriaceae.

RINCÓN GIOVANNA; DI CONZA JOSÉ; RADICE MARCELA; GUTKIND GABRIEL

Buenos Aires

Congreso; VII Congreso de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas. SADEBAC; 2012

AAM

A partir del 1998 se reportaron marcadores de codificación plasmídica que reducen la sensibilidad a quinolonas como la variante de la enzima acetyl transferasa de aminoglicósidos (AAC (6´)-Ib-cr), las bombas de expulsión (QepA y OqxAB) y las proteínas de tipo Qnr. A pesar de los elevados reportes de resistencia a quinolonas, son escasos los estudios realizados en nuestro país. En este sentido en el año 2009 se reportó la presencia de AAC (6´) ?Ib- cr, QnrB y QnrS. El objetivo del estudio fue determinar la frecuencia de los genes qnrA, qnrB, qnrS, qnrC, qnrD, aac(6´)-Ib-cr y qepA en aislamientos resistentes a cefalosporinas de tercera generación (C3G). Materiales y métodos: Se estudiaron 55 aislamientos de Enterobacteriaceae resistentes a C3G, recolectados durante la primera semana de octubre del 2010, en 15 hospitales de nuestro país. Se determinó la sensibilidad por dilución en agar a: ácido nalidíxico (NAL), ciprofloxacina (CIP), tobramicina (TOB), gentamicina (GEN), levofloxacina (LEV) y gatifloxacina (GAT) y por difusión en disco a NAL, CIP, GEN, estreptomicina (STR) y amikacina (AKN) según CLSI. La detección genotípica de qnrA, qnrB, qnrS, qnrC, qnrD, aac(6´)Ib y qepA se realizó por reacción en cadena de la polimerasa. La determinación de aac(6´)Ib-cr se realizó mediante la digestión con BseGI y se confirmaron por secuenciación. Resultados: De los 55 aislamientos, 22 fueron Klebsiella pneumoniae, 16 Escherichia coli, 6 Proteus mirabilis, 4 Klebsiella oxytoca, 3 Serratia sp., 3 Enterobacter sp. y 1 Providencia sp. Un 7,27% de los aislamientos fueron sensibles a CIP y NAL, y 23,6% a LEV y GAT. La sensibilidad a GEN, AKN y TOB correspondió a 43,6%, 61,8 % y 23,6 %, respectivamente. Todos los aislamientos fueron sensibles a STR. Los genes qnrB se detectaron en 45,4% (25/55) de los aislamientos presentándose en un 50% (8/16) E. coli, 45,4% (10/22) K. pneumoniae, en 1/3 Enterobacter, 2/4 K. oxytoca, 3/6 P. mirabilis y en 1 Providencia sp. El alelo de qnrB hallado en mayor frecuencia fue qnrB2, seguido de qnrB19, qnrB10, qnrB1 y qnrB6. No se detectó la presencia de los genes qnrA, qnrS, qnrC, qnrD y qepA. El gen aac(6´)-Ib se detectó en 76,3% (42/55) y de ellos 52,3% (22/42) correspondió a la variante aac(6´)-Ib-cr. Uno de los 42 aislamientos positivos fue heterocigoto por secuenciación, codificando tanto para la AAC (6´)?Ib como para su variante con actividad frente a fluoroquinolonas. El gen de aac(6´)-Ib se diferencia de su variante por dos cambios puntuales en la posición T304A/C y G535T perdiendo así el punto de corte con la enzima BseGI. En este trabajo se encontró que el 13,6% (3/22) de los aislamientos codificantes del gen aac(6´)-Ib-cr poseen el cambio T304A mientras el 86,3 % (19/22) el cambio se da T304C, siendo estas mutaciones equivalentes ya que los dos codones resultantes traducen para el mismo aminoácido. Conclusiones: En concordancia con reportes previos, se ha observado un alto porcentaje de resistencia a NAL y CIP en las enterobacterias resistentes a C3G, incluidas en el estudio. En este trabajo se reporta la prevalencia de los diferentes alelos de qnrB y la frecuencia de mutación en la posición 304 de aac(6´) Ib-cr en enterobacterias recuperadas de muestras clínicas con resistencia simultánea a C3G.