Obtención de anticuerpos anti-idiotipos que reconocen al antígeno de Thomsen-Friedenreich e inhiben la proliferación celular de tumores epiteliales

SENDRA, VICTOR G; IRAZOQUI, FERNANDO J

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Sociedad Argentina de Inmunología; 2007

SAI

Las cadenas de O-glicanos del tipo mucinas se encuentran frecuentemente sobre-expresadas y aberrantemente glicosiladas en células de tumores epiteliales. La estructura core 1 (Galbeta1-3GalNAcalpha-O-Ser/Thr) de O-glicanos, conocido como antígeno de Thomsen-Friedenreich (antígeno T), es un residuo normalmente críptico que se expone en células tumorales debido a una trunca expresión de glicanos. La lectina de Agaricus bisporus (ABL), es una proteína que reconoce principalmente al antígeno T, y posee además la característica de ser un inhibidor de la proliferación de células de tumores epiteliales. En el presente trabajo se desarrollaron anticuerpos anti-idiotipos con el propósito de obtener anticuerpos con una especificidad de reconocimiento glucídico similar a ABL. Aquí  se realizó una purificación de ABL por cromatografía de afinidad, la que se utilizó como primer molde en la generación de anticuerpos. Se inmunizaron conejos con ABL, lo que produjo altos títulos de anticuerpos que fueron cuantificados por ELISA. Luego se purificaron IgGs de conejo no inmune y anti-ABL mediante la utilización de proteína G-sepharosa. La fracción de IgG total anti-ABL fue ofrecida a una columna cromatográfica de ABL-sepharosa para purificar la fracción específica de IgG anti-ABL. Estas IgGs fueron conjugadas a KLH succiniladas y utilizadas como inmunógenos en ratones, a los que se les estudió la respuesta inmune humoral. Los anticuerpos así obtenidos (IgG e IgM) fueron capaces de reconocer antígenos asociados a tumores como antígenos T y Tn. Dicha interacción fue inhibida por estructuras glucídicas relacionadas a los antígenos tumorales. Estos anticuerpos también mostraron capacidad de reconocer células tumorales (MCF7 y HT29), interacción que fue parcialmente inhibida por moléculas relacionadas al antígeno T. Los anticuerpos anti-idiotipos aquí generados mostraron un definido efecto inhibitorio en la proliferación de líneas de tumores epiteliales como HT29 y MCF7.