Characterization of iron binding to frataxin from Psychromonas ingrahamii

JUAN RIGAL; MARTIN NOGUERA; JAVIER SANTOS; ERNESTO A. ROMAN

Carlos Paz, Cordoba, Argentina.

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2013

Sociedad Argentina de Biofísica

<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0in; margin-bottom:.0001pt; text-align:justify; mso-pagination:none; text-autospace:none; word-break:break-all; font-size:10.0pt; mso-bidi-font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-font-kerning:1.0pt; mso-fareast-language:KO;} @page Section1 {size:8.5in 11.0in; margin:1.0in 1.25in 1.0in 1.25in; mso-header-margin:.5in; mso-footer-margin:.5in; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} -->   La frataxina es una proteína muy conservada en los distintos reinos biológicos. En humanos, la ausencia de frataxina funcional ocasiona Ataxia de Friedreich. Su función biológica está relacionada con su capacidad de unir hierro y de transferirlo a otras proteínas. En nuestro laboratorio estamos interesados en el estudio de esta unión en diferentes variantes de frataxina, no sólo para caracterizar el sitio de unión, sino también para definir precisamente la estequiometria y afinidad. A su vez, estamos interesados en cómo la unión de hierro puede afectar  la estabilidad y dinámica del ensamble de conformaciones nativas. En este trabajo, a través de experimentos de ultrafiltración y exclusión molecular,  buscaremos  caracterizar la unión a hierro de la frataxina de P. ingrahamii ensayando distintas concentraciones de metal y de proteína para obtener una isoterma de unión que permita dar información termodinámica del proceso estudiado. El efecto de la unión en la estabilidad y dinámica serán estudiados en un futuro por experimentos en equilibrio y por técnicas de simulación computacional. Experimentos previos con otras variante de frataxina sugieren que la unión de hierro podría estar acoplada a la estabilización de especies oligomericas. Dicho postulado será verificado por experimentos de dispersión de luz y geles nativos.