Efecto de la inhibición de TGF-ß sobre la expresión de citoquinas hematopoyéticas en células madre mesenquimales de tejido adiposo humano (hASC).

T. M. RODRÍGUEZ; A. CARREA; M. PENA; A. SALDÍAS; M. IRIGO; R. GALLO; M.J. PERONE; R.A. DEWEY

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunion Cientifica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2012

La expansión ex vivo de las células madre y progenitores hematopoyéticos (HSPCs) requiere citoquinas que favorezcan su proliferación. Una estrategia se basa en el cocultivo con células madre mesenquimales. Éstas, secretan citoquinas hematopoyéticas (CH) que contribuyen a la multiplicación de las HSPCs y TGF-β, entre otros factores. Se sabe que TGF-β es un inhibidor de la proliferación de HSPCs. Nuestros estudios previos demostraron que en hASCs TGF-β1 disminuye la expresión de TPO, SCFa y b, IL-6 e IL-3, por otra parte aumenta la expresión de G-CSF, y LIF, mientras que Flt3L y GM-CSF no se ven afectadas. Ahora, evaluamos los perfiles de expresión de CH por qPCR en hASCs insensibles a TGF-β. Para ello, las células fueron transducidas con un vector lentiviral bicistrónico que codifica un mutante dominante negativo del receptor tipo II de TGF-ß (TβRII) y eGFP (Lt-TβRII-DN). Luego de la transducción y para trabajar con poblaciones altamente enriquecidas (90%), las hASC fueron purificadas utilizando un cell sorter. Inicialmente, en estudios de diferenciación in vitro, pudimos establecer que la inhibición de la cascada de TGF-ß en hACS no afecta su multipotencialidad. Posteriormente, se analizaron los perfiles de expresión de un panel 9 CH (TPO, SCFa y b, FL, IL-6, IL-3, G-CSF, LIF y GM-CSF). De esta manera pudimos documentar que en ASC insensibles a TGF-ß con respecto a células sensibles hay un expresión incrementada de FL (p