TßRII-B SE EXPRESA EN UN AMPLIO RANGO DE TIPOS CELULARES DE MODO ESPECÍFICO DE TIPO CELULAR Y SU MUTANTE, CARENTE DEL DOMINIO INTRACELULAR, NO FUNCIONA COMO DOMINANTE NEGATIVO

A. CARREA; T. M. RODRÍGUEZ; A. SALDÍAS; M. IRIGO; R. GALLO; M. J. PERONE; R. A. DEWEY

Congreso; LVI Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2011

TGF-ß es miembro de una familia de citoquinas que regulan una amplia variedad de procesos biológicos. La mayoría de las respuestas a TGF-ß están mediadas por los receptores TßRI y TßRII, que presentan una pequeña región extracelular, un dominio simple transmembrana y una región citoplasmática con un dominio serina/treonina quinasa. TßRII-B es una variante de splicing de TßRII que resulta en la adición de 25 aa en la región N-terminal del receptor maduro. TßRII-B se expresa en unos pocos tipos celulares, pero su presencia en otros tipos celulares no ha sido estudiada en detalle. En este trabajo, analizamos la expresión de TßRII-B en líneas celulares y en células sanguíneas. Inicialmente, pudimos identificar por RT-PCR la presencia de ambas variantes en todos los tipos celulares estudiados. Además, analizamos por qPCR los niveles relativos de las variantes en distintas líneas celulares. En la mayoría, TßRII-B se encuentra disminuida con respecto a TßRII de 2 a 17 veces (p<0,01). También determinamos que la expresión de ambas variantes varía entre las líneas celulares estudiadas (p<0,01), demostrando expresión específica de tipo celular. Además, analizamos si la sobreexpresión de un mutante de TßRII-B carente del dominio citoplasmático (TßRIIΔc) podría funcionar como un mutante dominante negativo. Para ello, generamos un vector lentiviral conteniendo TßRII-BΔc, transdujimos células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo y evaluamos por qPCR el efecto de la sobreexpresión de TßRII-BΔc sobre la expresión de TßRII. Vimos que cuando se expresa TßRII-BΔc en presencia de TGF-ß1, TßRII aumenta su expresión sugiriendo que no actúa como un receptor dominante negativo. Este resultado pudimos confirmarlo mediante estudios de inhibición de la proliferación por TGF-ß1. En resumen, pudimos establecer una distribución celular generalizada de TßRII-B; con variaciones específicas de tipo celular y que TßRII-BΔc no es un mutante dominante negativo.