EVALUACIÓN DE LAS HSP90 DE PLANTAS COMO ADYUVANTE DE ANTÍGENOS VACUNALES CONTRA TOXOPLASMA GONDII

SANCHEZ LOPEZ, E.; ALBARRACIN, R.; SANDER, V.; CORIGLIANO, M.; CLEMENTE, M.

Santa Fe

Congreso; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2016

Sociedad Argentina de Protozoologia

Previamente, demostramosque las proteínas Hsp90 de plantas podrían incorporarse como adyuvantes envacunas que requieran de una respuesta Th1 para conferir inmunidad. En estetrabajo, evaluamos a las proteínas Hsp90 de plantas como carriers/adyuvantesdel antígeno SAG1 de Toxoplasma gondiipara la modulación de la respuesta inmune murina, en el modelo de toxoplasmosis.SAG1 es una proteína abundante en taquizoitos de T. gondii y altamente inmunogénica que contiene epítopesestructurales para células T y B bien caracterizados, que generan respuesta detipo celular y humoral, respectivamente. La región que codifica para laproteína madura de SAG1 (SAG1m) y un péptido que va desde elaminoácido 221 al 322 (SAG1HC) conteniendo los epítopes T y B, seclonaron en marco con la proteína Hsp90.3 de Nicotiana benthamiana (NbHsp90.3). Luego, se purificaron lasproteínas de fusión recombinantes expresadas en bacterias: NbHsp90.3-SAG1my NbHsp90.3-SAG1HC, las cuales se usaron para inmunizar ratones C57BL/6.Como grupos control se utilizaron las proteínas SAG1m y NbHsp90.3solas y la mezcla de ambas. Se evaluó la respuesta humoral y se observó quetodos los grupos de ratones inmunizados con la proteína SAG1m mostraronuna producción significativa de anticuerpos anti-SAG1 respecto a los gruposcontrol (NbHsp90.3 y PBS). Interesantemente, se observaron diferencias en elperfil de los isotipos de inmunoglobulinas producidas en los ratonesinmunizados con las distintas formulaciones. Mientras los grupos NbHsp90.3-SAG1mo NbHsp90.3-SAG1HC mostraron un perfil asociado a una respuesta tipoTh1; los ratones inmunizados con la mezcla de ambas proteínas mostraron unperfil compatible con una respuesta mixta Th1/Th2. Finalmente, la inmunizacióncon la proteína SAG1m sola mostró un perfil asociado a una respuestatipo Th2. Por otro lado, se realizó un ensayo de protección donde se observóque todas las formulaciones vacunales que combinaron el uso de la proteínaNbHsp90.3 con el antígeno SAG1, ya sea como fusión o mezcla, indujeron unareducción de hasta el 44% en la formación de quistes de parásitos en cerebro. Porlo tanto, consideramos que el perfil diferencial en la producción deanticuerpos explicaría, en parte, la protección observada en los ratonesinmunizados ya que una respuesta protectiva efectiva contra T. gondii se correlaciona con unarespuesta inmune tipo Th1, la cual estaría determinada por el uso de laproteína NbHsp90.3 como carrier/adyuvante.